[发明专利]一种巴旦油脂肪酸成分指纹图谱的构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药指纹图谱的建立方法，具体涉及巴旦油脂肪酸成分GC-MS指纹图谱的构建方法。

背景技术

巴旦仁为巴旦杏干燥成熟的种子，巴旦杏(Amygdalus communis L.)，又称扁桃，维吾尔名为巴旦姆、巴达姆等，英文名Almond，是蔷薇科(Rosaceae)李亚科(Pmnoideae)桃属(Amygdalus L．)乔木，原产西亚和中亚山区，尤以美国加利福尼亚种植面积最大，中国主要集中在西北和西南地区，又以新疆天山以南的阿克苏，喀什、和田、库尔勒、阿图什种植的较多。

巴旦仁，商品名为美国大杏仁，不仅作为营养丰富的坚果可直接食用，还研发出巴旦仁酒、饮料等产品；同样巴旦仁也具有较高的药用价值，在新疆喀什的维吾尔医药中，60%的维吾尔医药制剂都配有它。巴旦仁收载于《卫生部药品标准-维吾尔药分册》，其气微，味甘；具有助护营养力，强身健脑，明目养颜，润肠止咳的功效；用于身体虚弱，咳嗽多痰，胸闷便秘，视弱面暗。现代药理实验表明，巴旦仁具有抗氧化、降低血胆固醇、预防心血管疾病、抗肿瘤、增强免疫能力、保肝等作用。巴旦仁主要含脂肪油、皂苷类、蛋白质、甾醇类、磷脂类等化学成分，其中脂肪油占55-66%。

巴旦油是通过压榨提取或有机溶剂提取得到的脂肪油，目前主要应用于食品、化妆品领域，巴旦油中的脂肪酸以不饱和脂肪酸为主，主要有油酸、亚油酸、亚麻酸等成分。现代药理学的研究表明，巴旦油具有抗氧化、降低血脂、血胆固醇、保肝等作用，这些作用与其所含的不饱和防酸成分有着直接关系。

然而巴旦杏的产地分布较广，种植品的种类繁多，仅在新疆喀什种植品就有十几种，因此不同产地、不同品种的巴旦仁其含油量、脂肪酸成分也有不同；同时，受自然气候、种植条件等多种因素的影响，同一地区同一品种的巴旦油之间也会产生不同程度的差异。鉴于巴旦仁的食、药两用价值，有必要对巴旦油的质量进行控制，目前对巴旦油的研究很多，主要集中在脂肪油的提取方法、成分分析、药理活性这三方面，没有关于巴旦油质量标准研究方面的报道，特别是从整体特征面貌上把握巴旦油的品质和质量。

因此，本发明为了控制巴旦油的质量，利用气质联用技术（GC-MS）建立了巴旦油指纹图谱的方法，并确立了巴旦油的标准指纹图谱。

发明内容

本发明的目的是提供一种巴旦油脂肪酸成分指纹图谱的构建方法，该方法是由巴旦油提取，甲酯化供试品溶液的制备，GC-MS分析，分析巴旦油供试品溶液，得到巴旦油脂肪酸成分的指纹图谱这几个步骤完成，通过对比所得巴旦油的GC-MS指纹图谱，确定共有峰9个，得到标准指纹图谱。该方法简便、稳定、精密度高、重现性好，能从整体特征面貌上控制巴旦油的质量，保证其质量稳定、可控，以此弥补巴旦油质量控制的空白，从而为巴旦油的质量控制提供科学的依据。

本发明所述的一种巴旦油脂肪酸成分指纹图谱的构建方法，按下列步骤进行：

a、巴旦油提取：取巴旦仁粉末，过20目筛，置锥形瓶中，加入正己烷，室温下超声50分钟，滤过，滤液挥干，即得黄色透明巴旦油状液体；

b、甲酯化供试品溶液的制备：取0.16g-0.19g巴旦油加入10 mL容量瓶中，再加入2 mL石油醚和甲苯的混合溶剂，轻轻振摇2 min，使油脂溶解，再加入3 mL 0.4 mol/L氢氧化钾-甲醇溶液，室温下静置10-15 min，待溶液澄清后加蒸馏水定容，旋转容量瓶，使全部石油醚-甲苯-甲醇溶液悬浮至容量瓶颈上部，再在上清液中加无水乙醇使其迅速澄清，取上清液经无水硫酸钠干燥后，作为供试品溶液；

c、气相色谱质谱分析：精密吸取供试品溶液0.2μL，注入GC-MS色谱仪，色谱条件为：色谱柱：HP-INNOWAX毛细管柱30 m×0.25mm×0.25μm，载气为氦气；进样口温度260℃；进样量0.2μL；分流比100:1 ；升温程序：起始温度为100℃，保持2min，以10℃/min的速率程序升温至180℃，保持2min，以2℃/min升温至220℃，保持5min；

质谱条件：电离方式为EI ，电离能量为70eV，离子源发生器温度为230℃，质量扫描范围为30-350amu；