[发明专利]一种猪去氧胆酸的精制方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种猪去氧胆酸的精制方法，具体的是一种由熔点为170℃以上的猪去氧胆酸粗品制备无腥味的、高纯度的猪去氧胆酸的方法，属于生物医药领域。

背景技术

猪去氧胆酸（Chenodeoxycholic Acid，HDCA）是广泛存在于动物胆汁中的一种生化物质，含量为0.1%～0.2%，化学名称为3α,6α-二羟基-5β-胆烷酸，分子式C24H40O4，分子量为392.58，在乙醇中易溶，丙酮中微溶，在乙酸乙酯、氯仿或乙醚中极微溶解，在水中几乎不溶。HDCA具有降血脂、镇痉和祛痰的作用，临床上用于治疗高血脂症、动脉粥样硬化症、气管炎、小儿病毒性上呼吸道炎症，以及由肝胆疾病引起的消化不良；对百日咳菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有一定的抑制作用；作为清开灵注射剂中的有效成分，经临床观察，对急性白血病的治疗有良好作用，体外实验证明HDCA具有诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖分裂的作用。

HDCA是人工牛黄配方的重要原料，其产品质量要求是熔点在170℃以上。清开灵制剂中HDCA是主要成分之一，其质量要求为熔点在190℃以上。并且，市售较纯一点的HDCA均有一定的腥味，标准号WS-10001-（HD-0882）-2002规定猪去氧胆酸的性状为：白色或类白色的粉末；无臭或微腥，味微苦。经过大量研究，本发明的发明人发现高纯度的HDCA是无腥味的，含腥味HDCA不但影响患者顺应性，还可能会带来一定的注射过敏反应。

中国专利公开号CN101037463A（公开日2007-09-19）利用不同胆汁酸甲酯-苯加成物在苯中的不同溶解度，将HDCA转化为猪去氧胆酸甲酯-苯加成物后碱分解，调节pH，沉淀，得HDCA纯品（熔点为197-198.2℃，纯度＞99%）；CN102838647A（公开日2012-12-26）将粗HDCA转化为粗猪去氧胆酸镁后，酸化、结晶，获得HDCA纯品（纯度＞99%，熔点199-200℃）；CN102617689A（公开日2012-08-01）将HDCA粗品用氨水溶解过滤去除不溶性杂质，乙酸乙酯除去脂溶性物质，酸化，析晶，过滤，水洗，干燥，得HDCA纯品（纯度≥99.8%，熔点＞197.5℃）；CN102775459A（公开日2012-11-14）将HDCA粗品经甲酯化、柱层析分离、碱水解后，加入无水乙醇或乙酸中，在机械搅拌条件下加热至有机溶剂水溶液完全沸腾，待HDCA溶解后，分次加入水，继续搅拌，待温度降至10～20℃，再机械搅拌30～60min，进行抽滤，得晶体，真空干燥，得HDCA纯品（纯度＞99%）。上述四种方法均需要将HDCA进行化学预处理，工艺步骤繁琐、不易操作、生产周期长，其中使用的苯为致癌物质。

CN102863497A（公开日2013-01-09）将HDCA粗品加入5～10倍重量的甲醇、乙醇、乙二醇、N,N-二甲基甲酰胺、冰醋酸或异丙醇，加热回流1～2小时，待其全部溶解后降至15～25℃，向其中滴加水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌1小时，过滤后，再加入5～10倍重量的甲醇、乙醇、乙二醇、N,N-二甲基甲酰胺、冰醋酸或异丙醇，加热回流1～2小时，待其全部溶解后降至15～25℃，向其中滴加水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌1小时，过滤干燥即得HDCA纯品（纯度＞98%）。由于甲醇、乙醇、乙二醇、异丙醇、N,N-二甲基甲酰胺对HDCA的溶解度太大，加入水以降低溶解度进行析晶，这是一种很常规的析晶方法，且由于本品的性质，加水后并未析出晶体而只是混浊，再进行过滤，不利于大生产。另外，采用重结晶工艺处理，产品的收率将会大大降低。

综上所述，为了提高HDCA用药安全性和顺应性，克服现有HDCA纯化方法产品腥味、工艺繁琐、不易操作、生产周期长、成本高等缺陷，急需开发一种具有易于工艺化大生产、成本低、生产周期短等优势的制备无腥味的高纯度的HDCA的精制方法。

发明内容

本发明提供了一种猪去氧胆酸的精制方法，其制备的猪去氧胆酸具有无腥味、高纯度的特点。该方法包括下列步骤：

步骤a：猪去氧胆酸中杂质的除去

取熔点170℃以上的猪去氧胆酸粗品，加酯类有机溶剂回流提取1～5次，每次加酯类有机溶2～10倍量、提取10～50分钟，过滤，滤液弃去，药渣备用；

步骤b：猪去氧胆酸的精制

将步骤a所得药渣加酯类有机溶剂回流提取8～40次，每次加酯类有机溶剂2～8倍量、提取10～40分钟，过滤，浓缩至热时有晶体析出时，放冷，过滤，残渣干燥粉碎，即得猪去氧胆酸成品。