[发明专利]布渣叶中黄酮类成分含量的快速测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药的质量控制方法，具体涉及布渣叶中黄酮类成分含量的快速测定方法，可同时测定布渣叶中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷4种黄酮类成分的含量的快速测定，属于中药质量检测技术领域。

背景技术

布渣叶为椴树科植物破布叶Microcos paniculata L.的干燥叶，产于广东、广西、海南、云南等地，印度、印度尼西亚亦有分布；在我国，尤以两广地区资源丰富，其中广东的阳西、湛江为主产地，均以野生为主。本品味微酸，性凉，无毒，具有清热利湿、健胃消滞的功效，用于治疗感冒发热、黄疸、食欲不振、消化不良、脘腹胀痛、泄泻、疮疡、蜈蚣咬伤等。

布渣叶主要含有黄酮、生物碱、有机酸、挥发油、鞣质、酚类等成分。其中的黄酮类成分具有多方面的生物活性，如抗脂质过氧化、抗衰老、清除自由基、降低血脂及血胆固醇、抗菌消炎、抗病毒、增强免疫功能等。

现有技术中采用HPLC法仅公开对布渣叶中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷4种黄酮类成分分别进行含量测定，已知的HPLC的含量快速测定方法均是对其中一种或两种黄酮进行测定，未公开记载同时对四种黄酮类成份进行测定的HPLC的含量快速测定方法，因此其过程较长、用时较多、效率不高。

因此，目前亟需建立一种可同时测定布渣叶4种黄酮类成分的快速快速测定方法，该方法满足制药过程中布渣叶药材快速质量控制的要求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可同时测定布渣叶4种黄酮类成分的快速快速测定方法。

本发明为实现上述目的所提供的技术方案是：

一种布渣叶中黄酮类成分含量的快速测定方法，其特征在于，其采用HPLC法，该方法为一次性同时测定布渣叶中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷4种黄酮类成分的含量。

其具体包括以下步骤：

（1）色谱条件

色谱柱：Shiseido Capcell pak MG C₁₈(4.6×250mm，5μm)柱；流动相：以甲醇为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长：280nm；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；

梯度洗脱条件为：

0～35分钟，流动相A21～35%，流动相B79～65%；

35～60分钟，流动相A35～48%，流动相B65～52%；

60～62分钟，流动相A48～80%，流动相B52～20%；

（2）对照品溶液的制备

取表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每mL含表儿茶素60μg、牡荆苷25μg、异牡荆苷40μg和水仙苷60μg的混合溶液，即得；

（3）供试品溶液的制备

取布渣叶药材粉末（过三号筛）约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率200W，频率40kHz)1小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

（4）测定法

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪进行测定，得表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷的含量。

本发明的快速测定方法简单、快速、准确，灵敏度高、精密度、稳定性好，可一次性同时测定未知含量的布渣叶样品中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷含量，可用于制药过程中布渣叶药材快速质量控制。

附图说明

图1，本发明实施例中布渣叶HPLC谱图，A.供试品；B.混合对照品；1表儿茶素；2牡荆苷；3异牡荆苷；4水仙苷。

具体实施方式

本发明提供的采用HPLC法，同时测定布渣叶4种黄酮类成分的快速测定方法的步骤为：

1仪器与试药

Agilent1200高效液相色谱仪，Mettler XS205DU型电子分析天平（瑞士）。

布渣叶样品分别采收自广东省各市县及在各大医药公司购买，共收集10份，所有样品经广东省中医研究所刘法锦教授鉴定为：椴树科植物破布叶Microcos paniculata L.的干燥叶，为《中国药典》2010年版收载的品种。表儿茶素（批号：878-200102）、牡荆苷（批号：111687-200602）购于中国药品生物制品检定所；异牡荆苷（批号：Y-127-110705）、水仙苷（批号：S-063-110926）购于成都瑞芬思生物科技有限公司；甲醇为色谱纯，液相用水为屈臣氏蒸馏水，其余试剂均为分析纯。