[发明专利]一种从红豆杉属植物中提取紫杉醇及其衍生物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从植物中分离提取天然有机化合物的方法，具体地说是一种从红豆杉属植物枝叶或根须中提取紫杉醇及其衍生物的方法。

背景技术

紫杉醇（简写T，式Ⅰ）作为临床一线抗癌用药，被广泛用于卵巢癌、乳腺癌、肺癌等多种实体癌的治疗。目前规模化生产紫杉醇的途径主要是从红豆杉属植物中直接提取或提取其半合成前体——10-去乙酰巴卡亭Ⅲ（简写10-DABⅢ，式Ⅱ），再通过合成手段合成紫杉醇。除以上两种化合物外，在红豆杉属植物中，还含有很多结构类似的紫杉烷化合物，例如10-去乙酰紫杉醇（简写10-DAT）、7-木糖-10-去乙酰紫杉醇（简写10-DAXT）、巴卡亭等，利用这些化合物，也可以合成紫杉醇或10-DABⅢ，进而再半合成紫杉醇。由于这些化合物在红豆杉植物中含量是紫杉醇的几倍到几十倍，因此实际生产中必须要将这些有用的紫杉烷化合物充分提取并加以利用，才能达到降低成本，保护资源的目的。

较为常用的从红豆杉属植物中提取制备紫杉醇方法，其工艺路线一般为：有机溶剂浸出(或超声波提取)——脱脂——萃取得到粗提物，并在此基础上发展了许多改进工艺。但是，这些现有工艺均大量使用溶剂，容易造成环境污染，成本也大大提高。

式Ⅰ  紫杉醇                 式Ⅱ  10-DABⅢ

中国专利200710178672.1公开了一种新型提取方法，即使用含有机酸的水溶液作为提取溶剂，通过超声方式，可快速高效的从欧洲红豆杉枝叶中提取出10-DABⅢ，提取率达到85-90%，该方法的优点是不直接使用溶剂进行提取，大大降低了成本，保护了环境。但是，由于溶解度的原因，该方法无法应用于其他紫杉烷的提取，造成了资源的浪费。

发明内容

本发明的目的是克服现有从红豆杉中提取紫杉烷化合物方法中的缺陷，提供了一种溶剂用量极低、收率高、能一次性提取出多种有用紫杉烷化合物的的提取方法。

本发明提供了如下的技术方案，包括以下步骤：

a、将红豆杉枝叶或根须50℃烘干后，粉碎成10-100目的粉末，优选40-60目，所述红豆杉可以是欧洲红豆杉，曼地亚红豆杉，云南红豆杉和南方红豆杉等；

b、用提取剂对红豆杉粉末进行超声或加热搅拌提取，重复2-5次，所用提取剂为溶剂和水的混合物，所选溶剂为N,N-二甲基甲酰胺或二甲基亚砜，或二者任意比例的混合物，溶剂与水的体积比为1：9～99，优选1：20～30；红豆杉粉末干重与提取剂的体积比（g:mL）为1∶3～10，优选1：5～8；提取温度为20～50度，优选30～40度；提取时间为0.5～5h，优选2～3h；

c、合并提取液，过滤后过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂优选AB-8、D101、HP20或XAD1600；大孔吸附树脂重量与红豆杉粉末干重的比例为1：2～20，优选1：5～10。

d、吸附完毕后，先用水进行洗脱，再用乙醇进行洗脱，收集乙醇洗脱液，减压蒸干，得到褐色混合物，用色谱级的甲醇定溶，并进行HPLC含量测定。所用乙醇的浓度为70～100%，优选80～90%，体积为3～10个树脂柱体积，优选4～6个柱体积。

采用本发明所述的方法，可同时提取出紫杉醇及其多种衍生物，提取率均达到90%以上，溶剂使用量低，可有效地降低成本，提高原料的利用率。

具体实施方式

下面结合实施例，对发明作进一步描述，但不构成对本发明的限制。

试验用试剂：分析纯N,N-二甲基甲酰胺，二甲基亚砜，乙醇(天津科密欧)，色谱纯甲醇和乙腈，水为超纯水，AB-8和D101大孔吸附树脂为南开大学化工厂产品，XAD1600树脂为美国罗门哈斯公司产品，HP20树脂为日本三菱公司产品。

液相色谱检测条件：色谱柱：Kromasil ODS（4.6×200mm，5μm），中国科学院大连化学物理研究所。流动相A为乙腈，流动相B为水，洗脱梯度程序为；0～10min，流动相B的含量为70%～60%；10～30min，流动相B的含量为60%～35%；30～44min，流动相B的含量为35%～10%；44～54min，流动相B的含量为10%～10%；流速为1.0mL/min；检测波长227nm；柱温：30度。

实施例1