[发明专利]特应性皮炎标记物及其利用技术

说明书

本申请是申请号为200680039191.6，申请日为2006年10月19日，申请人为株式会社芳珂、宫崎香、池泽善郎、相原道子和森山佳谷乃，发明名称为“特应性皮炎标记物及其利用技术”的申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及特应性皮炎标记物及其利用技术。

背景技术

特应性皮炎因遗传因素、环境因素等多种因素而引发疾病，其机理尚不明确。目前因特应性皮炎主要通过肉眼观察进行诊断，在临床医学上带有主观意识，因此缺乏客观性。特别是在特应性皮炎中，要判断决定治疗方法的皮疹的严重度是非常难的课题。还因为社会上对常用于特应性皮炎治疗的巨大支柱类固醇外用剂的忌讳潮流日趋强烈，所以希望有适合的治疗方法及合适的药量。因此，探索作为病情恶化、改善指标、治疗效果的表现的可将特应性皮炎严重度分类的特应性皮炎标记物是十分重要的课题。

目前，特应性皮炎标记物使用IgE。但是，显示IgE的抗体效价上升的疾病除特应性皮炎以外，还有支气管哮喘、肝硬化等，所以即使IgE的抗体值呈现高值，也未必就一定与特应性皮炎有关。最近有一新见解，指出因SCCA1在特应性皮炎患者的皮肤、血液中表达增高，所以可作为新型生物标记物(非专利文献1)。还有关于NGF、P物质(Substance P)、IL-16等作为特应性皮炎患者的血清标记物非常有效的报道(非专利文献2及3)。此外还有使用特应性皮炎的炎症部位和非炎症部位的皮肤，对特应性皮炎的生物标记物进行全面调查的方法。例如，基于使用DNA微阵列的基因表达分析，鉴定特应性皮炎关连基因的疾病标记物已申请了专利(专利文献1及2)。另外，还有如下报道，培养从特应性皮炎患者的皮肤组织中获取的表皮角化细胞、纤维芽细胞后，从细胞中提取蛋白质，通过二维电泳分离后，用质谱仪鉴定特应性皮炎标记物(非专利文献4及5)。

但是，至今为止还没有使用特应性皮炎模型小鼠皮肤组织中的蛋白质进行蛋白质组分析的先例。且对人体的特应性皮炎进行的蛋白质组分析，是从皮肤采集细胞，在初代培养后进行蛋白质组分析，所以很难说能立即反映人体的特应性皮炎的状况。

专利文献1:日本特开2005-110602号公报

专利文献2:国际公开第WＯ01-065259号pamphlet

非专利文献1:Clin.Exp.Allergy2005;35:1327-1333

非专利文献2:Br.J.Dermatol.2002Jul;147(1):71-79

非专利文献3:Br.J.Dermatol.2006Jun;154(6):1112-1117

非专利文献4:Proteomics2004，4，3446-3455

非专利文献5:Proteomics2006，6，1362-1370

发明内容

本发明的目的是提供作为特应性皮炎的客观性标记物而在诊断及治疗中有效的物质。且本发明的目的还是提供利用特应性皮炎标记物，筛选对特应性皮炎的预防或治疗有效的成分的方法。

本发明者对特应性皮炎模型小鼠(NC/Nga小鼠)涂布半抗原，人为诱发特应性皮炎。同时进行已知抑制特应性皮炎的乳铁蛋白处理来抑制炎症。使用此时的皮肤组织测定因特应性皮炎发病而发生变化的蛋白质。分析方法为使用二维电泳(2-DE)和质谱(MS)进行蛋白质组分析，对于经鉴定的蛋白质进一步用免疫印迹法确认其变化。

其结果，作为伴随特应性皮炎发病其表达增加的蛋白质，鉴定出FABP-5、载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1)、波形蛋白(Vimentin)、Rho GDI等。另外，作为伴随特应性皮炎的炎症其表达减少的蛋白质，鉴定出半乳糖凝集素-1、-3、-4、-7、-8(Galectin-1、-3、-4、-7、-8)等的半乳糖凝集素（Galectin）类、为细胞骨架蛋白的结蛋白(Desmin)、膜突蛋白(Moesin)、埃兹蛋白(Ezrin)、根蛋白(Radixin)、还有膜联蛋白Ⅱ(Annexin II)、烯醇酶1(Enolase1)、FABP-4、PARK7、HSP70、HSP90等。这些蛋白质的大多数在进行半抗原处理后再进行乳铁蛋白处理时显示出相反的变化，表明特应性皮炎有无发病与表达的增减有良好的相关性。