[发明专利]塔宾曲霉SZX-6及其发酵液和发酵液提取物与用途

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种塔宾曲霉（Aspergillus tubingensis）SZX-6，本发明还涉及该菌株的发酵液以及发酵液的提取物，本发明还涉及该发酵液以及发酵液提取物的用途。 

背景技术

自从上世纪50年代Newton等从海洋真菌Cephalosporium acremonium的发酵产物中发现抗菌化合物cephalosporin C以来，海洋微生物抗菌活性物质的研究日益成为药物研究的热点领域。海洋真菌迥异于陆生真菌的独特生存环境（如寡营养、高盐、弱碱性等）使海洋真菌形成特殊的代谢和防御体系，从而能够产生不同于陆生真菌的结构特异和活性优良的次生代谢产物。到目前为止，已从海洋真菌的发酵产物中发现了一千多种新的次生代谢产物，结构类型涉及生物碱、聚酮、大环内脂和萜类等，这些代谢产物呈现出良好的抗菌、抗肿瘤、抗病毒等生物活性。 

近十几年来，我国水产品养殖业发展迅速，水产品产量居世界首位，但也不断出现各种动物疾病。鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和霍乱弧菌(Vibrio cholerae)等是引起养殖动物疾病的主要病原细菌。水产养殖中抗菌药物的长期使用或滥用所引起的致病菌耐药性、高残留和环境污染问题日益严重。因此，开发新的高效、广谱和低污的水用抗生素具有重要的意义。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的塔宾曲霉SZX-6菌株。 

本发明所要解决的另一个技术问题是提供上述塔宾曲霉SZX-6菌株的发酵液及发酵液提取物。 

本发明所要解决的再一个技术问题是提供上述塔宾曲霉SZX-6菌株的发酵液及其提取物的用途。 

本发明是一种塔宾曲霉（Aspergillus tubingensis）SZX-6  CCTCC NO：M 2012540。本发明所涉及的菌株塔宾曲霉（Aspergillus tubingensis）SZX-6，已于2012年12月20日保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC NO：M 2012540，保藏地址：中国武汉市武汉大学，电话027-68754052。 

本发明还公开了一种塔宾曲霉SZX-6发酵液，其特点是，该发酵液以所述的塔宾曲霉SZX-6发酵获得，发酵方法为：将塔宾曲霉SZX-6菌种接种到海水沙氏液体培养基中，160 r/min，28℃培养7 d，获得塔宾曲霉SZX-6发酵产物，滤除菌丝体后获得发酵液；所述的海水沙氏液体培养基的组成为：葡萄糖 40 g/L、蛋白胨 10 g/L、陈海水定容。 

本发明还公开了一种塔宾曲霉SZX-6发酵液提取物，其特点是，该提取物以上述技术方案所述的塔宾曲霉SZX-6发酵液为原料，依次用等体积乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，得到乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物或者萃余物。 

本发明所述的塔宾曲霉SZX-6发酵液或者塔宾曲霉SZX-6发酵液提取物具有显著的抑菌用途，其可以抑制的菌为鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和霍乱弧菌(Vibrio cholerae)。 

本发明所述的塔宾曲霉SZX-6是从海水养殖动物三疣梭子蟹共附生微生物中分离得到。其分离纯化方法为：将三疣梭子蟹用无菌剪子剪碎，加入无菌水制成悬液，取0.1 mL均匀涂布沙氏固态培养基中，28℃恒温箱培养，待菌落长出后，挑取菌落划线纯化。所述沙氏固态培养基是将4% (W/V) 葡萄糖、1% (W/V) 蛋白胨和2% (W/V) 琼脂加热溶解后，加陈海水定容，在121℃灭菌20 min后获得。