[发明专利]MiR-31抑制剂用于抑制血管损伤后再狭窄的用途

说明书

技术领域

本发明涉及microRNA及其抑制剂的医药用途，具体涉及miR-31抑制剂用于制备抑制血管损伤后再狭窄的药物中的用途。本发明还涉及miR-31用于调控细胞E1A激活基因阻遏子蛋白的用途，和用于调控血管平滑肌细胞表型转化的用途。

背景技术

动脉粥样硬化（AS）、经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后再狭窄（RS）、移植后动脉病以及肺动脉高压等许多心血管系统疾病作为危害人类健康的危重疾病受到广泛关注。近年研究发现，成熟血管壁的血管平滑肌细胞（VSMC）在血管损伤后发生表型逆转，由生理状态下的分化表型（收缩表型）转变为去分化表型（合成表型），并获得增殖、迁移及合成、分泌大量细胞外基质的能力。VSMC由分化表型向去分化表型的转化是AS及PCI术后RS等疾病发生过程中新生内膜形成和管腔狭窄的重要病理基础。因此，对VSMC表型转化机制的研究是增生性血管病防治研究的重要方向。然而，在当今表型调控的研究领域，VSMCs表型基因表达的调控机制还有待明确。

人E1A激活基因阻遏子（human cellular repressor of E1A-stimulated gene,hCREG）基因是1998年哈佛医学院Gill克隆的一个细胞分化调控基因（Veal E，Mol Cell Biol，1998；18(9):5032-5041）。前期研究证实，在VSMC由合成型向分化型转化的过程中，CREG蛋白及mRNA的表达水平显著升高（Han Ya-Ling,Zhonghua Yi Xue ZaZhi,2005；85(1):49-53；Han Ya-Ling,J Mol Cell Cardiol，2011；50(4):723-30；Han Ya-Ling,J Mol Cell Cardiol，2010；48(6):1225-35），并且hCREG蛋白表达能明显抑制体外培养的人胸廓内动脉平滑肌细胞-HITASY的增殖并促进其分化（Han Ya-Ling,Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology,2005;21(5):570-574；Han Ya-Ling,Prog Biochem Biophys,2004;31(12):1099-1105；Han Ya-Ling,Prog Biochem Biophys,2005;32(6):517-522）。研究还发现，在球囊损伤后的大鼠颈动脉血管中，血管中膜的CREG基因的表达明显下降，且过表达CREG可以抑制VSMC的增殖和新生内膜的形成（Han Ya-Ling，Cardiovasc Res,2008；78(3):597-604；Han Ya-Ling，J Vasc Surg，2008；48(1):201-9），同时，经外膜包裹导入的pLNCX2-hCREG逆转录病毒有效抑制了球囊拉伤后小鼠颈动脉狭窄的发生（Han Ya-Ling，Chinese Journal of Pathophysiology,2007;23(10):1873-1877）。上述研究提示，hCREG是调控VSMCs分化的重要因子，在临床PCI术后RS的防治研究中具有潜在重要意义。但是，调控CREG基因表达的上游信号分子机制尚未阐明。

近年研究发现，miRNA（microRNA,miR）在基因表达调控方面具有重要作用，是基因调控领域的一个新的发现和突破口。miRNAs是一类内生的、非编码的小RNA，它通过抑制或者降解靶基因的mRNA，负性调节靶基因的表达。细胞中大约有30%的基因可受到miRNAs的直接调控。而且，单个miRNA可调节多个基因的表达。因此，miRNA是一个重要的转录因子，并且对细胞生物功能的调节起到了重要的作用。最近报道指出，miRNAs参与了很多心血管系统疾病的发生，其中与VSMCs表型转化基因有单一结合靶点的miRNAs的发现，揭示了心血管系统稳态的调节及血管损伤治疗靶点选择的重要机制。有研究指出，miR-31与肿瘤细胞的增殖、分化、迁移和转移有关，但其对于VSMC是否有调控作用，值得更加深入的研究。

发明内容

本发明通过大量实验证实，miR-31通过与hCREG mRNA3’UTR区结合，调控hCREG蛋白的表达，进而参与VSMC从分化表型到去分化表型的调控，由此完成了本发明。