[发明专利]噬氨副球菌LH-N40与异养硝化好氧反硝化微生物菌剂及制备方法与用途有效
申请号: | 201310061522.8 | 申请日: | 2013-02-27 |
公开(公告)号: | CN103146605A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 杨志林;董自斌;田凤蓉;张彬彬;徐军;云干;王开春;刘德敏 | 申请(专利权)人: | 中蓝连海设计研究院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01 |
代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人: | 刘喜莲 |
地址: | 222000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 噬氨副 球菌 lh n40 硝化 好氧反 微生物 制备 方法 用途 | ||
1.一种噬氨副球菌(Paracoccus aminovorans)LH-N40 CGMCC No. 6971。
2.一种异养硝化好氧反硝化微生物菌剂,其特征在于:该微生物菌剂含有权利要求1所述的噬氨副球菌(Paracoccus aminovorans)LH-N40 CGMCC No. 6971。
3.根据权利要求2所述的异养硝化好氧反硝化微生物菌剂,其特征在于:该微生物菌剂中,以质量分数计量,菌株的含量均不低于5%。
4.一种如权利要求2或3所述的异养硝化好氧反硝化微生物菌剂的制备方法,其特征在于,其步骤如下:
(1)将微生物菌剂中所述的菌株接种到固体培养基进行活化;
(2)活化后转接到相应液体培养基进行摇瓶培养,离心收集菌体,制备高浓度种子液;摇瓶培养条件为,pH:6.0~10.0,温度:10℃~35℃,转速:100~170rpm,培养时间:1~2 d;高浓度种子液中有效活菌数量≥5×109 cfu/mL;
(3)将上述高浓度种子液到接种到相应的一级种子罐进行放大培养1~7d,培养条件为:温度10℃~35℃ ;pH 6.0~10.0 ;DO 0.5~4.0mg/L,通气量0.4~0.6m3/h,搅拌速度110~150rpm,浓缩收集菌体,制备一级种子液;再将一级种子液转接到相应二级种子罐进行放大培养1~14d,浓缩收集菌体,制备二级种子液;再将二级种子液转接到相应三级种子罐进行放大培养1~21d,浓缩收集菌体,得到三级种子液;二级种子液和三级种子液的培养条件为:pH 6.0~10.0,温度10~35℃,DO 0.5~4.0mg/L,通气量0.4~0.6m3/h,搅拌速度110~150rpm;向三级种子液中添加微生物助剂,按照各菌株所需的比例混合即获得微生物菌剂;所述的微生物助剂是稳定剂和/或保护剂;
步骤(1)和(2)中所述的固体培养基和液体培养基组成为:牛肉膏3~5g/L,蛋白胨6~12g/L,氯化钠3~6g/L,蒸馏水1L,固体培养基中再加入1.5~2.5%琼脂;步骤(3)所述的一级种子液所用的培养基组成为:(NH4)2SO4 0.5~5g/L,葡萄糖0.5~1g/L, MgSO4 0.01~0.02g/L,K2HPO4 0.1~0.3g/L,FeSO4·7H2O 0.05~0.1 g/L,蒸馏水1L;二级种子液和三级种子液所用的培养基组成为:尿素0.5~5g/L,葡萄糖1~3g/L,K2HPO4 0.1~0.3g/L,MgSO4 0.01~0.02g/L,FeSO4·7H2O 0.05~0.1 g/L,蒸馏水1L。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,在步骤(3)中:所述的稳定剂选自甘油、乙醇的一种或其混合物;所述的保护剂选自活性炭粉末、硅藻土的一种或其混合物。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中所述的浓缩方法为自然沉降、离心或者过滤。
7.权利要求1所述的噬氨副球菌(Paracoccus aminovorans)LH-N40在处理含氮化工废水中用途。
8.权利要求2或3所述的微生物菌剂或者权利要求4或5或6所述的制备方法制得的微生物菌剂在处理含氮化工废水中用途。
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