[发明专利]小动物实验的灌注固定装置和方法

说明书

技术领域

本发明涉及实验动物灌注固定技术领域，特别是涉及一种小动物实验的灌注固定装置和方法。

背景技术

在实验动物组织病理学实验研究中，特别是进行原位杂交和免疫组化研究，为避免或减少死后组织形态及结构发生变化，常于动物处死前，采用灌注固定法。灌注固定是通过血管途径将固定液导入所需固定的组织器官内，将生活的细胞在原位及时迅速固定后，再摘取样品。经过灌注固定的组织具有一定的硬度，其所有组织结构维持在生前状态，因此选择经心灌注固定的组织在形态、组织结构完整性的维持具有重要的意义。

灌注固定方式可依据固定液注入口的不同分心脏和血管（门静脉、肝动脉、股动脉、腹主动脉等）两种灌注。各器官的组织结构不同，可以选择不同的灌注液注入口，如肝脏可从门静脉入口、肺脏可从肺动脉入口等。一般大动物多通过动脉，小动物可直接用注射针穿入心室或主动脉，或采用专门的灌注装置。

通常灌注固定多采用液体重力落差进行灌注固定，小个体动物多用人工注射的方法进行灌注固定，迄今为止，对于体重极小的动物灌注固定装置尚无报道。小动物如C57BL/6N以及新生大鼠体重轻（身长10-15cm，体重10-20g），其组织更小、娇嫩，如果固定不好，将导致取材困难。另外，动物处死血流供应停止后，组织尤其是脑和脊髓组织在短时间内极易自溶，故在灌注固定时操作确保迅速、快捷，以尽量保持组织结构的新鲜与完整，否则，时间稍久，脑细胞将发生一系列的变性、坏死，同样影响实验结果的真实性、可靠性和可重复性。

而且采用注射器或输液瓶与注射针组合的简易装置进行灌注固定，在实践中也存在诸多问题：

（1）手工控制注射器不易控制压力大小：灌注固定法使用注射器与注射针组合的简易装置操作时，压力由操作者手工控制，压力过小时，灌注效果不佳；压力过大时，会造成组织损坏（如血管破裂，心脏爆裂）。使用输液瓶与注射针组合的简易装置操作时，对大鼠及兔能够适用，但小动物由于血管细小该装置压力明显偏小，不能确保灌注效果。

（2）简易装置操作时需要至少两人同时配合操作：使用注射器与注射针组合的简易装置操作时通常需要两人以上同时配合操作，解剖灌注、控制注射器压力各需一人来完成，且操作较麻烦，可能导致小动物脑组织结构的不完整，影响实验结果的真实性、可靠性和可重复性。

发明内容

本发明的一个目的是针对现有技术存在的不足，提供一种小动物实验的灌注固定装置，它采用一个电机驱动生理盐水冲洗，另一个电机驱动固定液灌注，灌注效果好、操作方便、结构简单，且电机通过单片机实现全智能控制，不仅可以精确控制灌注的压力，且只需一人解剖、灌注即可，操作迅速、快捷，省时省力且工作效率高，具有广泛的应用领域。

本发明的另一个目的是针对现有技术存在的不足，提供一种采用小动物实验的灌注固定装置的灌注固定方法，它通过单片机实现全智能控制，不仅可以精确控制灌注的压力，而且能够实现生理盐水冲洗和固定液灌注之间衔接的连续性，提高小动物实验的灌注固定效果。

本发明的第一个目的是这样实现的：一种小动物实验的灌注固定装置，包括底座，所述底座上端面设有第一注射器固定座和第二注射器固定座，以及设有第一导向滑槽与第一注射器固定座对应，设有第二导向滑槽与第二注射器固定座对应，第一导向滑槽中滑动配合有第一滑块，第二导向滑槽中滑动配合有第二滑块，所述底座内分别设有第一步进电机和第二步进电机，所述第一步进电机通过第一丝杆螺母机构与第一滑块连接，所述第二步进电机通过第二丝杆螺母机构与第二滑块连接，所述第一步进电机、第二步进电机均电连接电机控制电路，底座上设有灌注流速调节按键和电机控制开关，所述灌注流速调节按键和电机控制开关均与电机控制电路电连接。

所述电机控制电路包括供电电源、单片机、显示电路、指令输入电路、第一步进电机驱动芯片和第二步进电机驱动芯片，所述供电电源用于给单片机、显示电路、指令输入电路、第一步进电机驱动芯片和第二步进电机驱动芯片供电，所述单片机的输入端与指令输入电路连接；所述单片机的第一输出端与第一步进电机驱动芯片的输入端连接，所述第一步进电机驱动芯片的输出端与第一步进电机连接；所述单片机的第二输出端与第二步进电机驱动芯片的输入端连接，所述第二步进电机驱动芯片的输出端与第二步进电机连接；所述单片机的第三输出端与显示电路的输入端连接。

所述单片机的型号为STC89C52，所述第一步进电机驱动芯片、第二步进电机驱动芯片的型号为L293D，所述显示电路采用型号为LCD1602的液晶显示模块。