[发明专利]一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法

权利要求书

1.一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法，其特征在于基于环介导恒温扩增技术(LAMP)对核盘菌进行快速鉴定，该方法共分三步： 

(1)运用引物的特异性进行LAMP恒温扩增，环介导恒温扩增技术(LAMP)反应体系及参数： 

反应体系： 

反应参数：63℃ 45min，80℃ 10min； 

(2)对上述LAMP扩增产物观察其颜色变化，并在3.0％琼脂糖凝胶电泳上分离，观察扩增结果； 

(3)鉴定是否为核盘菌菌株；如果LAMP扩增产物显示天蓝色，这时电泳图谱应为梯状条带，判定为核盘菌菌株；如果扩增产物为紫色，这时电泳图谱无条带扩增，判定为非核盘菌菌株。 

2.根据权利要求1所述快速鉴定核盘菌的分子检测方法，其特征在于：步骤(1)所述的用于LAMP反应中的两对引物具有特异性，所述的两对引物分别是： 

(1)外引物对： 

F3：5’-GACTTCGCTACCAAAGATAGCC-3’ 

B3：5’-AGATCTAGACCCCGGTATCG-3’ 

(2)内引物对： 

FIP：5’-GGCACGGAGAGATGGTAGAGAAGGCCAATCGAATGAAGCTCCCAC-3’ 

BIP：5’-TCGACCATGACAGCATCTTCTACCCACCAGGTCTTGGTCGTCTG-3’。