[发明专利]重组蛋白PACAP38-NtA及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种重组蛋白，特别涉及一种重组蛋白PACAP38-NtA及其编码基因与应用。

背景技术

垂体腺苷酸环化酶激活多肽（Pituitary Adenylate Cyclase-activating Polypeptide，PACAP）是Miyata等于1989年在研究下丘脑促垂体激素时发现的一种具有广泛生物学活性的多肽，是促胰液素/高血糖素/血管活性肠肽(vasoaetive intestinal peptide，VlP)家族中的新成员。

PACAP在体内存在两种形式，分别为含38个氨基酸的PACAP38和缺失羧基端11个氨基酸的截短肽PACAP27。PACAP38比PACAP27在组织中的含量更丰富，活性更高。PACAP及其受体不仅分布在中枢神经系统和周围神经系统，而且在周围组织和器官也广泛分布，如胰腺、胰岛、消化道、生殖腺等。PACAP主要有3种受体：PACIR、VPACIR和VPAC2R。PACIR是PACAP的特异性受体，受体VPACIR和VPAC2R是PACAP和VIP共同的受体。受体PACIR比VPACIR和VPAC2R在中枢神经系统的含量及分布多，3种受体在外周各脏器组织中均分布广泛。鉴于其分布及生物学特性，大量实验表明PAC1R在介导神经系统的发育和保护方面起重要作用。在眼部，PACAP及其受体主要分布在角膜、虹膜、睫状神经节、脉络膜和视网膜等处。

PACAP及其特异受体PACI在眼部分布广泛，PACAP不仅有营养及修复神经作用，还促角膜上皮修复及参与调解眼表炎症反应。因此对角膜瓣术后神经修复及角膜感觉功能恢复有重要促进作用，而仅用PACAP38作用于角膜及角膜神经，虽也具有一定的修复作用，但其使用量较大，修复时间较长。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种重组蛋白PACAP38-NtA。

本发明的另一目的在于提供编码所述的重组蛋白PACAP38-NtA的基因。

本发明的再一目的在于提供表达所述的重组蛋白PACAP38-NtA的菌株及其发酵方法以及所述的重组蛋白PACAP38-NtA的纯化方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种重组蛋白PACAP38-NtA，其氨基酸序列如下所示：

HSDGIFTDSYSRYRKQMAVKKYLAAVLGKRYKQRIKNKGSGGGSGGGGSGGGGSNCPERELQEEEEEANVVLTGTVEEIMNDVPVHHTYSCKVRVWRYLKGKDIVTHEILLDGGNKVVIGGFGDPLICDNQVSTGDTRIFFVNPAPQYMWPAHRNELMLNSSLMRITLRNLEEVEHCVEEHRKLLADKPNSYFTQTPPTP；

编码所述的重组蛋白PACAP38-NtA的核苷酸序列如下所示：

CACTCTGACGGTATCTTCACCGACTCTTACTCTCGTTACCGTAAACAGATGGCTGTTAAAAAATACCTGGCTGCTGTTCTGGGTAAACGTTACAAACAGCGTATCAAAAACAAAGGTTCTGGTGGTGGTTCTGGTGGTGGTGGTTCTGGTGGTGGTGGTTCTAACTGCCCGGAACGTGAACTGCAGGAAGAAGAAGAAGAAGCTAACGTTGTTCTGACCGGTACCGTTGAAGAAATCATGAACGACGTTCCGGTTCACCACACCTACTCTTGCAAAGTTCGTGTTTGGCGTTACCTGAAAGGTAAAGACATCGTTACCCACGAAATCCTGCTGGACGGTGGTAACAAAGTTGTTATCGGTGGTTTCGGTGACCCGCTGATCTGCGACAACCAGGTTTCTACCGGTGACACCCGTATCTTCTTCGTTAACCCGGCTCCGCAGTACATGTGGCCGGCTCACCGTAACGAACTGATGCTGAACTCTTCTCTGATGCGTATCACCCTGCGTAACCTGGAAGAAGTTGAACACTGCGTTGAAGAACACCGTAAACTGCTGGCTGACAAACCGAACTCTTACTTCACCCAGACCCCGCCGACCCCG；