[发明专利]修复重金属污染土壤的生物制剂及土壤修复方法

权利要求书

1.修复重金属污染土壤的生物制剂，其特征在于，包括光合细菌中红假单胞菌属的沼泽红假单胞菌和红细菌属的类球红细菌，其中，所述沼泽红假单胞菌和类球红细菌两种菌的总数量超过30亿个/毫升。

2.根据权利要求1所述的修复重金属污染土壤的生物制剂，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌是沼泽红假单胞菌ATCC17001菌株、N菌株和/或37号菌株；所述红细菌属的类球红细菌是类球红细菌ATCC17023菌株、T₂菌株和/或55号菌株。

3.根据权利要求2所述的修复重金属污染土壤的生物制剂，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌与所述类球红细菌的复配方法如下：将所述沼泽红假单胞菌和类球红细菌经过培养液培养到有效活菌数达到30亿个/毫升时，按照体积比1:2的比例均匀混合。

4.根据权利要求1、2或者3所述的修复重金属污染土壤的生物制剂的制备方法，其特征在于，其包括工艺步骤如下：（1）分别取原始菌种；（2）一级菌种培养；（3）二级菌种培养；（4）种子罐培养；（5）发酵罐培养；（6）无菌灌装。

5.根据权利要求4所述的修复重金属污染土壤的生物制剂的制备方法，其特征在于，所述一级菌种培养和二级菌种培养采用光照1000-3000LUX、培养温度25-30℃、厌氧培养3-4天；当二级菌种培养的菌种浓度达到1×10⁸个/毫升以上时，然后接种下一级培养。

6.根据权利要求4所述的修复重金属污染土壤的生物制剂的制备方法，其特征在于，所述种子罐培养采取黑暗中好氧发酵的培养方式，培养温度为28-30℃、好氧培养6-8天，其中好氧发酵中的通气比例为1:0.5、搅拌转速120-150转/分；

所述发酵罐培养采取黑暗中好氧发酵的培养方式，培养温度为28-30℃、好氧培养6-8天，当菌种浓度达到5×10⁹个/毫升以上即可无菌灌装，其中好氧发酵中的通气比例为1:0.5、搅拌转速120-150转/分。

7.根据权利要求6所述的修复重金属污染土壤的生物制剂的制备方法，其特征在于，所述一级菌种培养、二级菌种培养、种子罐培养和发酵罐培养所用的菌种培养基中溶解有包含以下浓度的组分：碳源：1-3g/L、氮源：1-3g/L、酵母浸膏：1-3g/L、蛋白胨：0.02-0.08g/L、磷酸氢二钾：0.2-0.8g/L、硫酸镁：0.01-0.03g/L、氯化钙：0.033-0.152g/L。

8.根据权利要求7所述的修复重金属污染土壤的生物制剂的制备方法，其特征在于，另外所述菌种培养基中还包含有微量元素溶液和维生素溶液，其中，微量元素溶液为在1000ml蒸馏水中含有1.5～2g FeCL₂·4H₂O₂，0.2～0.5g CoCL₂·6H₂O，0.01～0.02g NiCL₂·2H₂O，0.01～0.02gCaCL₂·5H₂O，0.07～0.1g MnCL₂·4H₂O，0.1～0.2g ZnCL₂，0.5～0.8g H₃BO₃，0.02～0.05mgNa₂M0O₄·2H₂O，0.01～0.03g Na₂SeO₃·5H₂O；且pH值用HCL调节至2-3；所述维生素溶液是1000ml蒸馏水中含有0.01～0.02g生物素，0.03～0.05g烟酰胺，0.02～0.03g对氨基苯甲酸，0.01～0.02g盐酸吡哆醛，0.01～0.02g泛酸钙，0.01～0.02g维生素B₁₂和0.05～0.1g酵母浸粉。

9.使用根据权利要求1-8所述的修复重金属污染土壤的生物制剂修复重金属污染土壤的方法，其特征在于，将修复重金属污染土壤的生物制剂淋施入污染土壤中，然后等待25-30天通过生物的活动减少重金属的污染。

10.根据权利要求9所述的使用修复重金属污染土壤的生物制剂修复重金属污染土壤的方法，其特征在于：其包括具体步骤如下：对于污染土层进行开沟处理，开沟深度为污染土壤层的厚度，淋施修复重金属污染土壤的生物制剂，使修复重金属污染土壤的生物制剂均匀渗透到受污染的土壤内；每亩每次使用6-10公斤修复重金属污染土壤的生物制剂，且所述修复重金属污染土壤的生物制剂稀释30倍以上后才淋施；淋施方式为间隔7天淋施一次，连续淋施4次。