[发明专利]一种好氧反硝化菌剂及其制备与应用有效
申请号: | 201310054249.6 | 申请日: | 2013-02-20 |
公开(公告)号: | CN103087918A | 公开(公告)日: | 2013-05-08 |
发明(设计)人: | 钟瑜;杨冠东;周卓为;杨础华;江洁芳;黎婉园;石笛;黄琼;丁年平 | 申请(专利权)人: | 广州市微生物研究所 |
主分类号: | C12N1/00 | 分类号: | C12N1/00;C12N1/20;C02F3/02;C02F3/34;C12R1/38;C12R1/10 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 倪小敏 |
地址: | 510663 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 好氧反 硝化 及其 制备 应用 | ||
技术领域
本发明涉及好氧反硝化领域,更具体地涉及一种好氧反硝化菌剂及其制备与应用。
背景技术
制革工业在我国历史悠久,并且此行业在我国拥有丰富的资源,成本较低,因此制革行业在我国得到快速发展。目前制革工业生产一般包括脱脂、浸灰脱毛、软化、鞣制、染色加工、干燥、整饰等几个工段,加工过程中需要添加多种化学品,从而使得废水中含有油脂、胶原蛋白、动植物纤维、有机无机固形物、硫化物、氨氮化物、重金属铬、表面活性剂、染料等多种污染物质和有毒物质。制革工业综合废水的水质特性为:ρ(CODcr)为3000—4000mg/L,ρ(BOD5)为1000—2000mg/L,ρ(SS)为2000—4000mg/L,pH值为8-11,ρ(NH3-N)为200—350mg/L。
目前,制革工业废水已是水环境污染的重要污染源之一。国内的大多数皮革污水处理中氨氮都不能达标,对环境造成严重污染。制革工业废水的生物处理有厌氧池和曝气池法,厌氧池适用于高浓度的有机废水处理,当原水降到一定COD值后,再结合曝气法达到最终排放标准。许多中小企业因为厌氧池法耗时长、占地面积大等原因,而直接采用曝气池法处理。在高含氮量的制革废水中,反硝化菌是主要的降解菌之一,绝大部分的反硝化菌都专性厌氧菌。本发明从制革工业废水中分离出能在好氧条件下进行反硝化的菌株,通过发酵扩大培养,制作冻干菌剂,高效得去除制革工业废水中的氨氮。
发明内容
本发明为了得到高效的去除制革工业废水中的氨氮,提供一种好氧反硝化菌剂,所述的菌剂中含有施氏假单胞菌,地衣芽孢杆菌。
所述的菌剂为冻干粉。
再提供一种好氧反硝化菌剂的制备方法,包括以下步骤:
S1. 分别发酵施氏假单胞菌和地衣芽孢杆菌,取菌液,离心得到菌泥,按质量比1:1混合;
S2. 添加冷冻干燥保护剂:向步骤S1所得菌泥中添加冷冻干燥保护剂,用生理盐水混匀,得混合菌液;
S3. 将步骤S2所得混合菌液均匀铺于托盘,于-40℃低温冰箱预冻6-10h;入冷冻干燥机,-35℃续冻4-8h;将冷冻干燥机的温度从-35℃逐步上升到5℃,持续时间为30h-48h;加入至温度为20℃-25℃,干燥到含水量在3%以下时,出柜;
S4. 磨碎S3所得的冻干粉,过100目筛,即得。
所述的冷冻干燥保护剂为淀粉和海藻糖的混合物。按重量比计,所述的淀粉用量为菌泥重量的0.25-0.4倍。按重量比计,所述的海藻糖用量为菌泥重量的0.035-0.05倍。
根据需求再提供一种曝气池反硝化的方法,在曝气池中添加本申请制备所得的好氧反硝化菌剂。
所述的添加为先往曝气池中添加3-6g/L的好氧反硝化菌剂,然后补加0.3-0.6g/L的好氧反硝化菌剂。
本发明的施氏假单胞菌是通过筛选从制革工业废水中得来的,具体的筛选方法如下:
将工业废水先通过初筛营养型培养基,再通过选择性培养基,再通过反硝化培养基,最后通过发酵培养基,获得大量纯种菌株,所得的纯种菌株经鉴定为施氏假单胞菌和地衣芽孢杆菌。
所述的培养基分别为以下成分:
1)初筛营养型培养基:LB培养基(g/L):
蛋白胨 10.0
酵母膏 5.0
NaCl 7.0
琼脂 18.0
pH 6.8-7.2。
2)选择性培养基(g/L):
天冬酰胺酸 1.0
KNO3 1.0
KH2PO4 1.0
FeCl2 0.03
CaCl2 0.1
MgSO4 0.8
BTB 1.0
琼脂 20.0
pH 7.0~7.2。
3)反硝化培养基(g/L):
琥珀酸钠 4.5
NaNO2 0.005
KH2PO4 1.5
Na2HPO4 0.5
NH4Cl 0.6
酪蛋白 5.0
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