[发明专利]分离的多肽及其应用无效
| 申请号: | 201310051280.4 | 申请日: | 2013-02-16 |
| 公开(公告)号: | CN103319574A | 公开(公告)日: | 2013-09-25 |
| 发明(设计)人: | 施一公;颜宁;邓东;殷平;严创业 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
| 主分类号: | C07K14/195 | 分类号: | C07K14/195;C12N15/31;C12N15/63;C12N15/70;C12R1/64 |
| 代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 李志东 |
| 地址: | 100084 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 分离 多肽 及其 应用 | ||
技术领域
本发明涉及生物技术领域,更具体的,本发明涉及分离的多肽及其应用。
背景技术
TALEs(Transcription Activator Like Effectors,转录激活子样效应因子)主要存在于植物致病菌(Xanthomonas)。当病原菌侵染植株时,病菌会通过其自身的III型分泌系统将包括TALE在内的一系列效应分子注入到植物细胞内。这些效应分子通过影响宿主细胞的信号传递,基因表达等方式来协助病菌进一步扩增。TALE则是这些效应分子蛋白中最大的一类,它类似植物的转录激活子一样行使功能。
然而,目前关于TALE的研究仍有待改进。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此,本发明的一个目的在于提出一种具有能够有效地统一性识别DNA碱基的多肽。
在本发明的第一方面,本发明提出了一种分离的多肽,其特征在于,所述多肽包含:
多个重复氨基酸序列,所述重复氨基酸序列为:LTPDQVVAIASX1X2GGKQALETVQRLLPVLCQAHG,
其中,
X1为H或N,
X2为选自I、L、M、W、C、T、P、H、S、N、E、Q、H、K和R的之一。
发明人发现该多肽能够有效地特异性识别碱基。具体地,通过改变X1X2的氨基酸残基类型,可以改变所识别的碱基。具体的,总结如下表1所示:
表1
需要说明的是,在本文中采用单个英文字母表示氨基酸,具体代表如下:A,丙氨酸;C,半胱氨酸;D,天冬氨酸;E,谷氨酸;F,苯丙氨酸;G,甘氨酸;H,组氨酸;I,异亮氨酸;K,赖氨酸;L,亮氨酸;M,甲硫氨酸;N,天冬酰胺;P,脯氨酸;Q,谷氨酰胺;R,精氨酸;S,丝氨酸;T,苏氨酸;V,丙氨酸;W,色氨酸;Y,络氨酸。
根据本发明的实施例,上述多肽还可以具有下列附加技术特征:
根据本发明的一个实施例,所述多肽可以包含至少10个所述重复氨基酸序列。优选地,所述多肽包含20个所述重复氨基酸序列。由此,可以进一步提高所述多肽特异性识别碱基的效率。
根据本发明的一个实施例,所述多肽可以进一步包括:DNA修饰酶区域结构域。由此,可以在多肽识别碱基之后,对DNA序列进行修饰。
在本发明的第二方面,本发明提出了一种分离的寡核苷酸。根据本发明的实施例,所述寡核苷酸编码可以编码前面所述的多肽。优选地,所述寡核苷酸的序列为选自下面序列的至少一种:
CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTAATTCTGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA(SEQ ID NO:1),
CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTAATACAGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA(SEQ ID NO:2),
CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTCATACAGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA(SEQ ID NO:3),
CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTAATCATGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA(SEQ ID NO:4),
CTTACCCCACAACAAGTTGTGGCAATAGCTTCTCATTACGGTGGTAAACAAGCCCTTGAGACGGTTCAAAGACTTCTACCAGTTCTTTGTCAGGCACATGGA(SEQ ID NO:5),
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