[发明专利]一种生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺

权利要求书

1.一种生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺，其特征在于，包括以下步骤：

（1）原料复合酶处理：在青蒿草干叶叶面喷洒相当于青蒿草干叶重量0.1%－0.3%的植物提取复合酶，再将青蒿叶堆积在温度40±2℃的暗室内，堆头上面覆盖一层塑料膜，发酵12－24h；

（2）有机溶剂提取：将经步骤（1）发酵的青蒿叶片晾干或烘干，将青蒿干叶投入渗漉装置中，按每千克原料青蒿草干叶加提取有机溶剂A≥5.0升的比例加入有机溶剂A，浸泡2-4h，再开始渗漉，收集渗漉液；

（3）层析柱层析：将步骤（2）所得渗漉液直接通过装有硅胶的层析柱，硅胶的重量为青蒿草干叶原料重量的1/5－1/2，过柱流出液回收用作步骤（2）中提取溶剂，再用有机溶剂B洗脱硅胶柱，薄层层析监测，直到层析柱无青蒿素流出，收集洗脱液；

（4）结晶：将步骤（3）收集得到的洗脱液浓缩干，得到青蒿素粗品；青蒿素粗品用有机溶剂A洗涤至少2次，每次洗涤按每千克青蒿素粗品加1.0－2.5升有机溶剂A的比例加入有机溶剂A，然后抽滤，滤渣放入烘箱中在55-75℃下干燥4-8h，得经洗涤干燥的青蒿素粗品，按每千克经洗涤干燥的青蒿素粗品加有机溶剂C 90－110升的比例加入有机溶剂C，溶解，过滤，滤液浓缩至原体积的5%－8%；浓缩后的滤液静置，0-30℃结晶4-12h，过滤，得到青蒿素。

2.根据权利要求1所述的生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺，其特征在于，步骤（1）中，所述植物提取复合酶由以下重量百分比的酶组成：纤维素酶20%-30%、半纤维素酶10%-15%、果胶酶20%-30%、脂肪酶25%-35%、淀粉酶1%-1.5%、蛋白酶1%-1.5%、β－葡聚糖酶1%-1.5%、木聚糖酶1%-1.5%，各种酶的重量百分比之和为100％。

3.根据权利要求1或2所述的生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺，其特征在于，所述有机溶剂A为石油醚、6#溶剂油、120#溶剂油、200#溶剂油或正已烷。

4.根据权利要求1或2所述的生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺，其特征在于，所述有机溶剂B为石油醚、6#溶剂油、120#溶剂油、200#溶剂油或正已烷, 所述石油醚、6#溶剂油、120#溶剂油、200#溶剂油、正已烷中含有4.0wt%-5.5wt%的乙酸乙酯。

5.根据权利要求1或2所述的生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺，其特征在于，所述有机溶剂C为体积浓度≥85%的乙醇。

6.根据权利要求1或2所述的生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺，其特征在于，步骤（2）中，将青蒿干叶投入渗漉装置中，按每千克原料青蒿草干叶加提取有机溶剂A 5.4－6.5升的比例加入有机溶剂A。

7.根据权利要求1或2所述的生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺，其特征在于，步骤（2）中，渗漉时，加压表压为10kPa-60kPa。

8.根据权利要求1或2所述的生物酶-渗漉法提取青蒿素的工艺，其特征在于，步骤（4）中，按每千克经洗涤干燥的青蒿素粗品加有机溶剂C 95－105升的比例加入有机溶剂C溶解洗涤干燥的青蒿素粗品。