[发明专利]一种全封闭管路化的蛋白质纯化系统及其在无菌无热原蛋白质药物制备上的应用

权利要求书

1.一种全封闭管路化的蛋白质纯化系统，其特征在于至少包括以下模块：

微滤模块，所述微滤模块包括中空纤维柱、补液池、循环流通池和实现密闭连接所需的相应的接头、接头卡箍和导管，所述中空纤维柱的上端和下端分别与所述循环流通池的上下各一个接口密闭连接，所述循环流通池下部的另一个接口与所述补液池的一个接口密闭连接，在连接所述中空纤维柱下端和所述循环流通池下端的导管处设置蠕动泵以提供循环动力，在连接所述循环流通池和所述补液池的导管处设置蠕动泵以提供液体从所述补液池到所述循环流通池的动力；

至少一个蛋白质层析模块，所述至少一个蛋白质层析模块中的每一个包括蛋白层析柱、层析系统、洗脱液池、平衡液池、废液收集池和实现密闭连接所需的相应的接头、接头卡箍和导管，所述洗脱液池和所述平衡液池通过所述层析系统的入口多通阀与所述蛋白层析柱密闭连接，所述废液收集池通过所述层析系统的出口多通阀与所述蛋白层析柱密闭连接，该模块由所述层析系统提供动力；和

超滤模块，所述超滤模块包括中空纤维柱、循环流通/成品收集池、废液收集池和实现密闭连接所需的相应的接头、接头卡箍和导管，所述中空纤维柱的上端和下端分别与所述循环流通/成品收集池的上下各一个接口密闭连接，所述循环流通/成品收集池的另一个接口作为所述超滤模块的入口，所述中空纤维柱的滤出接口与所述废液收集池密闭连接，在连接所述中空纤维柱下端和所述循环流通池下端的导管处设置蠕动泵以提供循环动力；

其中，所述微滤模块与所述至少一个蛋白质层析模块中的第一个之间通过滤出收集/待纯化样品池连接，所述滤出收集/待纯化样品池的一个接口与所述微滤模块的中空纤维柱的滤出接口密闭连接而另一个接口与所述至少一个蛋白质层析模块中的第一个的层析系统的入口多通阀密闭连接；

当所述至少一个蛋白质层析模块的数目大于1时，所述至少一个蛋白质层析模块之间通过纯化样品收集/待纯化样品池连接，所述纯化样品收集/待纯化样品池的一个接口与前一个蛋白质层析模块的出口多通阀密闭连接而另一个接口与后一个蛋白质层析模块的出口多通阀密闭连接；并且

所述至少一个蛋白质层析模块中的最后一个与所述超滤模块之间通过纯化样品收集/待超滤样品池连接，所述纯化样品收集/待超滤样品池的一个接口与所述至少一个蛋白质层析模块中的最后一个的出口多通阀密闭连接，而另一个接口与所述超滤模块的入口密闭连接，在连接所述超滤模块的入口和所述纯化样品收集/待超滤样品池的导管处设置蠕动泵以提供液体从所述纯化样品收集/待超滤样品池到所述超滤模块的入口的动力；

并且其中，在所述补液池、循环流通池、洗脱液池、平衡液池、废液收集池、循环流通/成品收集池、滤出收集/待纯化样品池、纯化样品收集/待纯化样品池、纯化样品收集/待超滤样品池上预留有洗消液口。

2.根据权利要求1所述的蛋白质纯化系统，其中所述微滤模块中的中空纤维柱的微滤孔径为0.22-0.45μm。

3.根据权利要求1所述的蛋白质纯化系统，其中所述至少一个蛋白质层析模块的所述蛋白层析柱中的层析介质包括：亲和层析介质、离子交换层析介质、疏水层析介质、凝胶过滤层析介质、反向层析介质和/或混合机制层析介质。

4.一种利用权利要求1所述的蛋白质纯化系统纯化蛋白质的方法，所述方法包括以下步骤：

洗消处理步骤，利用洗消液通过所述各个池上预留的洗消液口对所述各个池进行洗涤消毒处理。

微滤步骤，利用所述微滤模块中的中空纤维柱，以切向流滤过的方式，除去液态培养表达物中的大颗粒和可能损害层析介质的杂质；

层析步骤，利用所述至少一个蛋白质层析模块的蛋白层析柱中的层析介质在相适应的缓冲液条件下，对经过所述微滤步骤的样品进行层析纯化；和

超滤浓缩和/或缓冲液置换步骤，利用所述超滤模块中的中空纤维柱，以截留方式对通过所述层析步骤获得的样品进行浓缩，和/或置换到所述样品可稳定保存的缓冲液体系中，最终获得蛋白质成品。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述超滤模块中的中空纤维柱的截留分子量小于目标蛋白分子量的一半，中空纤维膜面积与批次处理原液体积成正比。