[发明专利]梭菌AUH-JLC39及其在鸢尾黄素转化中的应用有效
申请号: | 201310045085.0 | 申请日: | 2013-02-05 |
公开(公告)号: | CN103146598A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 王秀伶;郭常亮;邵子强;刘明月 | 申请(专利权)人: | 河北农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P17/06;C12R1/145 |
代理公司: | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人: | 李荣文 |
地址: | 073001 *** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 梭菌 auh jlc39 及其 鸢尾 黄素 转化 中的 应用 | ||
1.一种梭菌(Clostridium sp.)AUH-JLC39,保藏号为CGMCC No.7221。
2.根据权利要求1所述的梭菌AUH-JLC39在鸢尾黄素转化中的应用,其特征在于包括下述步骤:
(1)菌株AUH-JLC39的培养
将低温冷冻保存的梭菌AUH-JLC39融化并按10-15%接种量接种到盛有新鲜BHI液体培养基的试管中,在厌氧工作站内37°C下培养20-24小时;再以10-15%接种量将试管中的菌株AUH-JLC39重新转接到盛有新鲜BHI液体的培养基中,继续在厌氧工作站内培养18-24小时作为种子液;
(2)底物鸢尾黄素与菌株AUH-JLC39共培养与代谢产物的分离纯化
①底物鸢尾黄素与菌株AUH-JLC39共培养
将菌株AUH-JLC39的种子液按10-15%接种量转接到液体培养基中培养,根据三角瓶中培养基体积加入浓度为40-60毫摩尔/升鸢尾黄素母液,使得鸢尾黄素在培养基中的浓度为0.8-1.0毫摩尔/升,然后在厌氧工作站内培养48-60小时,即可将底物鸢尾黄素高效转化为二氢鸢尾黄素;
②代谢产物的分离纯化
用等体积的乙酸乙酯将三角瓶内培养物萃取2次,萃取液过滤后蒸干,加入100%甲醇溶液,用制备柱在HPLC上进行分离制备二氢鸢尾黄素。
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