[发明专利]具有免疫保护性的脑多头带绦虫烯醇酶TmENO重组蛋白有效
申请号: | 201310043128.1 | 申请日: | 2013-02-04 |
公开(公告)号: | CN103131719A | 公开(公告)日: | 2013-06-05 |
发明(设计)人: | 李文卉;付宝权;曲自刚;谢志宙;刘静宜 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N15/60 | 分类号: | C12N15/60;C12N9/88;C12N15/70;C12N15/11;A61K39/00;A61P33/10 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张晋 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 免疫 保护性 多头 绦虫 烯醇酶 tmeno 重组 蛋白 | ||
1. 一种具有免疫保护性的脑多头带绦虫的重组蛋白,其特征是这种具有免疫保护性的重组蛋白是脑多头带绦虫烯醇酶TmENO重组蛋白,其氨基酸序列是GenBank登录号JQ627651的ORF序列编码的氨基酸序列SEQ No. 5。
2.根据权利要求1 所述的具有免疫保护性的脑多头带绦虫重组蛋白,其特征在于对其编码基因序列按大肠杆菌偏爱密码子进行优化,优化后的基因序列为SEQ No. 6。
3.权利要求1所述的重组蛋白的制备方法,其特征在于以脑多头蚴原头节基因组DNA为模板,分别以上下游引物SEQ No. 1和SEQ No.2进行PCR扩增得到该基因全序列。
4.权利要求2所述的重组蛋白的制备方法,其特征在于:在登陆号为JQ627651的ORF序列的5′端和3′端分别加上酶切位点NdeⅠ/ XhoⅠ后,然后将其按下表进行密码子优化,
后人工合成基因SEQ No.6,接着将合成的SEQ No.6 的DNA产物与载体pET30a分别用NdeⅠ/XhoⅠ双酶切进行连接,构建重组表达质粒pET30a-TmENO,再将pET30a-TmENO转化到表达菌BL21(DE3) 中进行诱导表达,收集菌体并进行纯化处理得到。
5.根据权利要求4所述的重组蛋白的制备方法,其特征在于以脑多头蚴原头节cDNA为模板,分别以上下游引物SEQ No. 3和SEQ No.4进行PCR扩增得到该基因编码的蛋白。
6.根据权利要求4所述的重组蛋白的制备方法,其特征是人工合成该基因编码的蛋白。
7.用于扩增权利要求2的重组蛋白的引物SEQ No. 3和SEQ No.4。
8.权利要求1或2所述的具有免疫保护性的脑多头带绦虫重组蛋白在制备脑多头蚴病疫苗中的应用。
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