[发明专利]一种耐氧化性淀粉酶突变体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种耐氧化性淀粉酶突变体，其特征在于SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中催化区域内蛋氨酸突变为亮氨酸。

2.权利要求1所述的淀粉酶突变体，其特征在于所述蛋氨酸为第135位、第204位、第219位、第237位、或第307位。

3.权利要求2所述的淀粉酶突变体，其特征在于所述蛋氨酸为第237位。

4.能表达生产权利要求1-3任一所述淀粉酶突变体的载体。

5.能表达生产权利要求1-3任一所述淀粉酶突变体的细胞系或基因工程菌。

6.权利要求1所述淀粉酶突变的的制备方法，其特征在于以SEQ ID NO.1所示序列为出发序列，将淀粉酶催化区域内的单个或多个蛋氨酸突变为亮氨酸，提高淀粉酶的耐氧化性。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于具体步骤为：

1)根据SEQ ID NO.1所示序列，采用化学全合成的方法全合成后克隆到质粒pET-22b(+)中，构建重组质粒pAAQ；

2)对淀粉酶进行模拟，获得淀粉酶空间结构；

3)通过对淀粉酶空间结构进行分析，确定要突变的蛋氨酸位点；

4)设计突变引物，对淀粉酶基因序列进行定点突变，将蛋氨酸位点突变为亮氨酸，获得含有突变淀粉酶序列的重组载体；

5)将突变后重组载体转化大肠杆菌BL21，诱导表达，获得淀粉酶突变体。

8.权利要求1-3任一所述淀粉酶突变体在纺织退浆、洗涤剂、化工、食品领域的应用。