[发明专利]负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架及其制备方法有效
申请号: | 201310031905.0 | 申请日: | 2013-01-28 |
公开(公告)号: | CN103100109A | 公开(公告)日: | 2013-05-15 |
发明(设计)人: | 郭瑞;张渊明;蓝咏 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | A61L15/44 | 分类号: | A61L15/44;A61L27/54;A61L31/16 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 裘晖;陈燕娴 |
地址: | 510632 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 负载 万古霉素 明胶 丝素 蛋白 复合 支架 及其 制备 方法 | ||
1.一种负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)将10~50mg/ml万古霉素溶液加到明胶微球中,于4~25℃放置过夜后冷冻干燥,得到万古霉素/明胶微球复合物;每克明胶微球加入万古霉素溶液2~10ml;
(2)将步骤(1)的万古霉素/明胶微球复合物加入2~10wt%丝素蛋白溶液中,搅拌均匀,冷冻干燥,得到负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架;每毫升丝素蛋白溶液加入5mg万古霉素/明胶微球复合物。
2.根据权利要求1所述的负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述的10~50mg/ml万古霉素溶液采用以下方法进行制备:将万古霉素溶于去离子水中,搅拌均匀,得到10~50mg/ml万古霉素溶液。
3.根据权利要求1所述的负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述的明胶微球的粒径为5~30μm,膨胀率为400~500%。
4.根据权利要求1所述的负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述的明胶微球采用以下方法进行制备:将0.1g山梨糖醇酐油酸酯加到盛有80ml植物油的烧瓶中,于60℃搅拌0.5~5h后加入10wt%明胶水溶液10ml,继续搅拌180min后冰浴搅拌15min,然后加入25wt%戊二醛水溶液0.1ml,继续搅拌2h,加入4℃丙酮40ml,搅拌15min,静置,过滤,得到微球;将微球泡在10ml丙酮中,于4℃固化24h后用1mol/L氨基乙酸浸泡30min,离心,取沉淀,用丙酮和异丙酮洗涤的沉淀,将沉淀置于去离子水中浸泡过夜,冷冻干燥,得到明胶微球。
5.根据权利要求4所述的负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于:所述的搅拌的速度为300~400r/min;所述的离心的条件为于25℃、10000r/min离心10min。
6.根据权利要求1或4任一项所述的负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于:所述的冷冻干燥的条件为-60℃冷冻干燥24h。
7.根据权利要求1所述的负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于:步骤(2)中所述的2~10wt%丝素蛋白溶液采用以下方法进行制备:将蚕茧加入100℃0.2wt%NaCO3水溶液中煮2h,100ml0.2wt%NaCO3水溶液加入1g蚕茧,脱胶后用去离子水清洗丝素至中性,于60℃烘干,得到丝素蛋白;取丝素蛋白,加入9.8mol/L溴化锂水溶液中,40~60℃水浴加热3~5h后用去离子水透析2~4天,离心,得到2~10wt%丝素蛋白溶液。
8.根据权利要求7所述的负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架的制备方法,其特征在于:所述的蚕茧为去蛹的蚕茧;所述的负载万古霉素/明胶微球复合物的丝素蛋白支架孔隙率为75~95%,孔径为50~200μm。
9.一种负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架,由权利要求1~8任一项所述的制备方法得到。
10.权利要求9所述的负载万古霉素/明胶微球的丝素蛋白复合支架在皮肤伤口愈合、伤口敷料或骨修复技术领域中进行应用。
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