[发明专利]一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法有效

专利信息
申请号: 201310031750.0 申请日: 2013-01-29
公开(公告)号: CN103116029A 公开(公告)日: 2013-05-22
发明(设计)人: 林齐心;陈赞烽;熊玉林;王小亚 申请(专利权)人: 福州迈新生物技术开发有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N21/78
代理公司: 福州元创专利商标代理有限公司 35100 代理人: 蔡学俊
地址: 350002 福建省福州市鼓*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 免疫 化用 显色 系统 灵敏度 亲和力 测定 方法
【权利要求书】:

1.一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法,其特征在于:所述测定方法包括下列工艺步骤:将能与二抗发生特异性免疫反应的一抗按不同稀释的浓度预先吸附在玻片上,一个浓度的一种多肽在玻片上经上样后形成一个小圆斑;或是将经过包埋的不同浓度的一抗石蜡切片预先放置在玻片上,与病理组织切片同时经历常规免疫组化操作步骤,以特定一抗的染色结果来判定免疫组化过程二抗显色系统的灵敏度及亲和力。

2.根据权利要求1所述的一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法,其特征在于:所述预先吸附在玻片上是以物理吸附的方式,吸附在免疫组化用的玻片上。

3.根据权利要求1所述的一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法,其特征在于:所述常规免疫组化操作步骤包括:干燥、石蜡作用、脱蜡、水化、修复、二抗反应、染色。

4.根据权利要求2所述的一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法,其特征在于:所述石蜡作用是将一抗点样在玻片上并干燥后,将玻片加入熔化的石蜡中浸泡,保证点样位置浸泡于石蜡中,然后将载玻片取出冷却固化。

5.根据权利要求1所述的一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法,其特征在于:所述一抗的染色结果,是指一抗的斑点颜色从浓度由低到高表现为逐渐加深的现象;再通过显微镜对病理组织切片进行观察,根据病理组织切片上靶位颜色可显示的最低浓度判定检测一抗的最低浓度,以确定二抗检测系统的灵敏度。

6.根据权利要求1所述的一种免疫组化用二抗显色系统灵敏度、亲和力的测定方法,其特征在于:所述以特定一抗的染色结果来判定免疫组化过程二抗显色系统的灵敏度及亲和力的具体方法为:对染色结果进行拍照,用图像软件对呈色斑点进行光密度测量,通过对应一抗浓度与光密度,计算二抗检测系统与一抗的亲和力;一抗与二抗结合显示的光密度值达到饱和值50%时,其一抗的浓度即为该二抗显色系统的亲和力指数,以μg/L表示,通过比较不同来源二抗样品的亲和力指数衡量二抗的亲和力高低。

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