[发明专利]CEACAMl蛋白磁粒的制备方法和应用

权利要求书

1.一种CEACAMl蛋白磁粒的制备方法，其特征是：以人体肝细胞cDNA文库为模板，扩增目的基因人体CEACAM1，通过异源表达技术在大肠杆菌（E. coli BL21）中表达CEACAM1细胞外特定结构域蛋白；通过对该蛋白质进行变复性及凝胶过滤层析，得到可溶的CEACAMl融合蛋白；以Fe₃O₄为载体，经硅酸包衣，在酸性环境中与硅烷反应、在碱性环境中与戌二酸酐反应，制成CEACAMl蛋白磁粒。

2.按权利要求1所述的CEACAMl蛋白磁粒的制备方法，其特征及具体步骤为：以人体肝细胞cDNA文库为模板，通过PCR扩增目的基因人体CEACAM1，所用的一对引物序列为Ceacam1-F:5'-AAAGGATCCATGAGCTGGTACAAAGGGGA-3'，Ceacam1-R:5'- GAAACTCGAGTTAGGTGTCTGAAGGGGAAATG-3'，将经BamHI/XhoI处理过的人体CEACAM1编码区序列和pET-28a(+)连接构建表达载体；把构建好的表达载体转化E.coli BL21（DE3），经IPTG诱导后，E.coli BL21（DE3）大量表达包涵体形式的人体CEACAM1；包涵体洗涤及重悬浮后，依次经过变性、凝胶过滤层析、复性和二次凝胶过滤层析，获得可溶的人体CEACAM1；以Fe₃O₄为载体，经硅酸包衣后，先后在酸性环境中与硅烷反应、在碱性环境中与戌二酸酐反应，制成表面带有活性羧基的磁性微球；羧化磁珠经结合液清洗并重悬后，加入CEACAM1融合蛋白及偶联剂，室温振摇20～24小时，即成为CEACAMl蛋白磁粒复合物。

3.按权利要求1所述的CEACAMl蛋白磁粒的制备方法，其特征是：通过此方法制备的CEACAMl蛋白磁粒复合物，核心部分为表面带有活性羧基的磁性微球，外层为以共价键与羧基结合的CEACAMl融合蛋白，整个复合物表面直径约200nm～1um。

4.一种权利要求1、2或3所述的方法在制备分离检测淋病奈瑟氏菌的CEACAMl蛋白磁粒复合物中的应用。

5.一种权利要求1、2或3所述的方法在制备分离检测水体蓝藻的CEACAMl蛋白磁粒复合物中的应用。