[发明专利]一种恶性肿瘤治疗性疫苗及其组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种恶性肿瘤治疗性疫苗及其组合物。

背景技术

目前，恶性肿瘤依然是威胁人类生存的头号杀手，严重干扰患者的健康和影响生存质量，其治疗方法主要有手术、化疗、放疗与生物治疗四种模式。虽然用手术、化疗及疗常规治疗可以清除大部分肿瘤细胞并能使多数患者的病情得到缓解，但化疗、放疗大都对患者存在着严重的毒副作用。且这些治疗方法达不到完全根除癌细胞的效果，大多数病人最终死于肿瘤的复发。因此继手术、化疗、放疗后，生物治疗已经成为肿瘤综合治疗的重要手段。当前，肿瘤生物治疗策略主要有细胞因子疗法、细胞疗法、基因治疗、靶向治疗等。但目前大多数生物治疗的有效性还远未达到令人满意的程度，其主要原因是这些治疗不能有效地激活免疫系统清除肿瘤细胞。近年来，随着分子生物学和基因工程的发展，肿瘤疫苗成为研究的热点之一，其原理是通过激活患者自身免疫系统，以达到清除或控制肿瘤的目的。现阶段研究较多的肿瘤疫苗有肿瘤细胞疫苗、肿瘤抗原疫苗、以DC（树突状细胞）为基础的疫苗以及核酸疫苗等。尽管现有疫苗表现出一定的抗肿瘤效应，但存在疗效不强、安全性差等缺点，因此，如何克服免疫系统对肿瘤抗原的免疫逃逸，研制出副作用小，临床疗效满意的肿瘤疫苗是其能否取得成功的关键。

免疫增强剂（immunopotentiator）是通过不同方式，达到增强机体免疫力的一类免疫治疗药物。临床上常用于治疗与免疫功能低下有关的疾病及免疫缺陷病。目前针对免疫增强剂的研究很多。

现代药理学研究表明，药物加工到纳米水平之后，可显著提高吸收度、扩散度，有利于降低药物的某些副作用，提高药效。通常微生物细胞的破碎技术为机械法、非机械法两种。机械法包括：高压匀浆器、高速珠磨机、超声波震荡器，非机械法包括化学法、酶解法、渗透压冲击法、冻融法和干燥法。虽然细胞破碎的方法很多，但都难以将细胞破碎到粒度均一的纳米水平。将药物加工到其粒度绝大部分都小于500nm从技术角度讲是难于实现的。

转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)是一组具有多重作用的调节蛋白，具有调节细胞增长、协助肿瘤细胞免疫逃逸的作用。转化生长因子β-2是TGF-β家族里最主要的亚型。通常情况下，癌症病人的免疫抑制中多伴有TGF-β2水平的提高，TGF-β2水平与癌症病人的预后也有密切关系。TGF-β2对天然杀伤细胞、淋巴细胞激活细胞、树突细胞具有拮抗作用。肿瘤细胞性疫苗有助于增强机体对肿瘤相关抗原的提呈作用，加强机体对肿瘤细胞的清除。

RNA干扰现象是由FIRE等在1998年首先发现的，是指通过正、反义RNA片段形成双链RNA，从而特异性地抑制靶基因转录后表达的现象。作为高效、特异的调节基因表达的技术，RNA干扰已成为基因功能和信号传递系统上下游分子相互关系研究的有力工具。抑制TGF-β2的表达可以逆转肿瘤的免疫逃逸。

为此，本发明提出一种恶性肿瘤治疗性疫苗及其组合物。

发明内容

本发明的首要发明目的在于提出了一种恶性肿瘤治疗性疫苗。

本发明的第二发明目的在于提出了一种恶性肿瘤治疗性疫苗组合物。

为了实现本发明的目的，采用的技术方案为：

一种恶性肿瘤治疗性疫苗，所述的恶性肿瘤治疗性疫苗为肿瘤细胞系，所述的肿瘤细胞系包含人TGF-β2反义核酸的质粒。

所述的肿瘤细胞系选自肺癌肿瘤细胞、肝癌肿瘤细胞、乳腺癌肿瘤细胞、胃癌肿瘤细胞、胰腺癌肿瘤细胞或结肠癌肿瘤细胞。

所述的肺癌肿瘤细胞选自：人肺腺癌细胞株SK-LU-1、人肺腺癌细胞株Rh-2，人大细胞肺癌NCI-H-460，人肺鳞癌细胞株NCI-H-520、人非小细胞肺癌细胞A549、人非小细胞肺癌细胞NCI-H358、人非小细胞肺癌细胞NCI-H1650、人非小细胞肺癌细胞HCC827、人非小细胞肺癌细胞NCI-H1299、人肺癌细胞株MSTO-211H、人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H1975、人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087、人小细胞肺癌细胞NCI-H2227、人非小细胞肺癌细胞NCI-H23、人肺腺鳞癌细胞NCI-H596、人非小细胞肺癌细胞NCI-H838、人肺鳞癌细胞SK-MES-1[SKMES-1；SKMES1]、人肺鳞癌细胞LTEP-s、人肺腺癌瘤株Calu-3、人肺鳞癌细胞NCI-H2170、人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087、人非小细胞肺癌细胞NCI-H23、人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H1975、人非小细胞肺癌细胞NCI-H838、人肺癌细胞H1299或人小细胞肺癌细胞NCI-H446、