[发明专利]一种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变荧光PCR熔解曲线检测试剂盒

权利要求书

1.一种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变荧光PCR熔解曲线检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括：

特异扩增五种突变位点c.1360C>T、c.1376G>T、c.1381G>A、c.1387C>T和c.1388G>A所在序列的上游引物F1和下游引物R1，其中，F1的碱基序列如SEQ ID NO：1所示，R1的碱基序列如SEQ ID NO：2所示；

特异扩增三种突变位点c.871G>A、c.1004C>A和c.1024C>T所在序列的上游引物F2和下游引物R2，其中，F2的碱基序列如SEQ ID NO：3所示，R2的碱基序列如SEQ ID NO：4所示；

特异扩增突变位点c.95A>G所在序列的上游引物F3和下游引物R3其中，F3的碱基序列如SEQ ID NO：5所示，R3的碱基序列如SEQ ID NO：6所示；

特异扩增两种突变位点c.383T>C和c.392G>T所在序列的上游引物F4和下游引物R4，其中，F4的碱基序列如SEQ ID NO：7所示，R4的碱基序列如SEQ ID NO：8所示；

特异扩增五种突变位点c.487G>A、c.493A>G、c.517T>C、c.519C>T和c.592C>T所在序列的上游引物F5和下游引物R5，其中，F5的碱基序列如SEQ ID NO：9所示，R5的碱基序列如SEQ ID NO：10所示；

以及用于检测上述十六种突变位点的荧光探针。

2.如权利要求1所述的一种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变荧光PCR熔解曲线检测试剂盒，其特征在于：所述荧光探针包括：

用于检测突变位点c.1360C>T的荧光探针P1，其碱基序列如SEQ ID NO：11所示；

用于检测突变位点c.871G>A的荧光探针P2，其碱基序列如SEQ ID NO：12所示；

用于检测突变位点c.1004C>A和c.1024C>T的荧光探针P3，其碱基序列如SEQ ID NO：13所示；

用于检测突变位点c.1376G>T、c.1388G>A、c.1381G>A和c.1387C>A的荧光探针P4，其碱基序列如SEQ ID NO：14所示；

用于检测突变位点c.95A>G的荧光探针P5，其碱基序列如SEQ ID NO：15所示；

用于检测突变位点c.383T>C和c.392G>T的荧光探针P6，其碱基序列如SEQ ID NO：16所示；

用于检测突变位点c.487G>A和c.493A>G的荧光探针P7，其碱基序列如SEQ ID NO：17所示；

用于检测突变位点c.517T>C和c.519C>T的荧光探针P8，其碱基序列如SEQ ID NO：18所示；

用于检测突变位点c.592C>T的荧光探针P9，其碱基序列如SEQ ID NO：19所示。

3.如权利要求2所述的一种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变荧光PCR熔解曲线检测试剂盒，其特征在于：所述荧光探针5’端的荧光基团包括ALEX-350、FAM、VIC、TET、CAL Fluor Gold540、JOE、HEX、CAL FlourOrange560、TAMRA、Cal Fluor Red590、ROX、CAL Fluor Red610、TEXASRED、CAL Flour Red635、Quasar670、CY3、CY5、CY5.5或Quasar705，所述荧光探针3’端的淬灭基团包括DABCYL、BHQ、ECLIPSE或TAMRA。