[发明专利]一种玉米胚三重接种转基因技术

权利要求书

1.一种玉米胚三重接种转基因技术，其特征在于，对玉米种子的胚进行针刺接种、抽真空浸泡接种、常压浸泡接种等复合处理措施，使之充分侵染，它包括①玉米种子消毒，②无菌水浸种，③刺胚接种，④接种液抽真空浸泡接种，⑤接种液常压浸泡接种，⑥暗箱培养6个步骤。

2.根据权利要求1所述的转基因技术，其特征在于，所述的玉米种子消毒的做法是：选取饱满的玉米种子顺序用乙醇、84消毒液消毒，之后用灭菌水洗尽消毒液。

3.根据权利要求1所述的转基因技术，其特征在于，所述的无菌水浸种的做法是：将种子转入灭菌水中30℃浸泡24小时，使种子充分吸胀并萌动。

4.根据权利要求1所述的转基因技术，其特征在于，所述的刺胚接种的做法是：将萌动的种子取出置于已灭菌的培养皿中，用钢针蘸取OD600为0.6的已转入双元载体的农杆菌接种液扎刺胚芽和胚根。

5.根据权利要求1所述的转基因技术，其特征在于，所述的接种液抽真空浸泡接种的做法是：将刺完的种子放在含有烟草叶提取物和400μmol/L乙酰丁香酮的农杆菌接种液中浸泡，22℃抽真空（-0.1MPa）30min。

6.根据权利要求1所述的转基因技术，其特征在于，所述的接种液常压浸泡接种的做法是：气压恢复正常后，将种子放在接种液中继续浸泡3hr。

7.根据权利要求1所述的转基因技术，其特征在于，所述的暗箱培养的做法是：将处理好的种子置于发芽盒中，22℃恒温培养箱暗培养3天即可进行转基因植株的鉴定。