[发明专利]低温诱导红鳍东方鲀雄性化的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种红鳍东方鲀的育苗方法，尤其是无需紫外线照射、无需投喂性激素、操作简单的低温诱导红鳍东方鲀雄性化的方法。

背景技术

红鳍东方鲀（Takifugu rubripes）是鲀属中个体最大、毒性最小、经济价值最高的名贵鱼类。因其肉鲜味美、富含蛋白质、脂肪含量低且含有丰富的维生素B1、B2以及硒、锌等多种微量元素，一直为日本、韩国和中国人所青睐，尤其是日本人将红鳍东方鲀奉为“鱼中之王”，河鲀料理-“生鱼片”独领风骚，加之日本音译名“福古”有吉祥之意，所以历来是日本食文化的重要代表。

研究表明，红鳍东方鲀血液、肝脏、卵巢和消化道等内脏具有毒性，而肌肉、嘴、精巢无毒，正常情况下（水温20℃）培育的红鳍东方鲀雌雄比是1:1，也就是说养殖生产的50%的生殖腺（卵巢）不能食用。红鳍东方鲀雌鱼的生殖腺指数较高，繁殖期卵巢最高可占鱼体重的20~30%，对于红鳍东方鲀雌鱼来说，可食用的部分极少；红鳍东方鲀精巢在日本作为高级食物，价格与松阪牛肉及金枪鱼相媲美，每100g售价2000日元（人民币160元左右），价格十分昂贵，因此雄河鲀价格比雌河鲀高1.5~2倍。

鱼类的性别分化一般认为是遗传因子和环境因子相互作用的结果，但就环境因子来说，现在普遍发现温度是影响鱼类性别分化的首要因素。在鱼类中有很多关于温度影响性别的报道，如Desprez等（1998）研究报道，蓝色罗非鱼(Oreochromis aureus)的雌雄比率随着温度的变化而变化，在34℃时蓝色罗非鱼的后代雄性比例高于雌性，雄性比例高达97.8％ ；在27℃时蓝色罗非鱼的雌、雄比例趋于平衡，雄性为63％。尼罗罗非鱼和奥里亚罗非鱼在高温（34~37℃）时，产生较高的雄性率，而莫桑比克罗非鱼则在低温（19或20℃）时能增加雄鱼的比例。海鲈(Dicentrarchuslabrax)在33℃正常温度孵化其性比偏向雄性，而在性腺发育易变期15℃低温孵化内产生全雄群体。Goto等采用高温诱导处于性别分化期的条斑星鲽，也获得了100%的雄性率。迄今为止，至少在日本牙鲆、斑点叉尾鮰、月银汉鱼等近20种鱼类成功进行了温度处理诱导性逆转实验。但是，迄今为止，还没有关于低温诱导红鳍东方鲀雄性化的相关报道。

发明内容

本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种无需紫外线照射、无需投喂性激素、操作简单的低温诱导红鳍东方鲀雄性化的方法。

本发明的技术解决方案是：一种低温诱导红鳍东方鲀雄性化的方法，其特征在于按如下步骤进行：

选取肥满度高、性腺发育良好的健康雌雄鱼进行人工催产授精，授精卵在20℃水温条件下孵化45~75d，再放入15~17℃水温下培育35~65d。

 本发明可快速生产雄性红鳍东方鲀苗种，苗种中雄性率为65~80%，平均雄性率为75%，即不用紫外线照射，也不投喂性激素，避免了繁琐的操作程序，廉价、易操作，有利于大规模生产使用。

附图说明

图1是本发明实施例1与现有技术雄雌结果示意图。

图2是本发明实施例1红鳍东方鲀仔鱼137天二期精巢组织学的图片。

图3是本发明实施例1红鳍东方鲀仔鱼125天二期卵巢组织学的图片。

具体实施方式

实施例1：

选取肥满度高、性腺发育良好的健康红鳍东方鲀雌雄鱼进行人工催产授精，授精卵在正常水温20℃条件下孵化50d，再放入16℃水温下培育50d，孵化及培育的其它条件同现有技术。

同时以正常水温（20℃），按照现有技术的方法孵化、培育受精卵100天做为对照组。

性别鉴定：从对照组取33尾、本发明实施例1中取40尾所培育苗种，摘出性腺，用Bouin’s液固定，6小时后换80%酒精。用常规酒精梯度脱水、二甲苯透明、石蜡包埋、LEICA-RM 2016切片机连续切片，厚度为7μm。采用苏木精-曙红（H.E）染色，用中性树胶封片，在Olympus AH2下观察并显微摄影。

雄雌结果如下表所示，结果表明本发明实施例的雄性比例可达75%，而对照组的雄性比例平均只达50%

本发明实施例1的137天二期精巢组织学照片如图2所示；

本发明实施例2的125天二期卵巢组织学照片如图3所示。

实施例2：

选取肥满度高、性腺发育良好的健康红鳍东方鲀雌雄鱼进行人工催产授精，授精卵在20℃水温条件下孵化75d，再放入15℃水温下培育35d。

本发明实施例2的雄性比例可达80%。