[发明专利]模板法制备诊疗协同纳米颗粒释放体系的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种诊疗协同释放体系的制备方法，具体涉及一种模板法制备诊疗协同纳米颗粒释放体系的方法。

背景技术

癌症是严重危害人类健康和生命的疑难疾患，居疾病死亡率之首，其早期诊断和后期治疗都至为重要。在早期诊断方面，癌症成像学检测法可以对小体积肿瘤的位置、范围、形态进行精确的定位和判断，以确定原发部位癌灶及有无转移。在后期治疗方面，化学疗法占较大比例，近40年来发展很快，疗效不断提高。但目前的抗癌药物和成像造影剂大多存在水溶性差、对肿瘤组织的选择性差、疗效低、毒性大、使用单一造影剂容易产生错误的诊断结果、使用单一药物治疗易产生多药耐药性等缺点，限制了临床应用，并难以实现剂型的多样化。增加疏水药物和造影剂的水溶性、提高造影成像效果、克服耐药性具有十分重要的现实意义和研究价值，是医药化学领域亟待解决的问题。为了增加癌症诊断和治疗效果并减小毒副作用，全球许多科学家都竞相研发最新型的纳米药物载体材料和技术，致力于把疏水性药物或造影剂通过某些载体包裹以对其进行增溶。

近年来，随着生物技术的不断发展，各种新型的药物载体层出不穷，其制备工艺逐步完善，作用机制进一步阐明、剂型逐步改善、毒性和免疫原性大幅降低，特别是大量实验数据证明大多数的药物载体可以提高药物治疗指数和造影剂的成像效果、降低药物毒性、减小药物副作用、减小剂量。

尽管药物载体发展迅速，且具备了许多优点和特点，其临床应用并不像预期的那样广泛，主要原因在于载体的引入极大的降低了载药量、载体的存在给机体增加了额外的代谢负担、载体的合成成本高且耗时，更重要的是，具有协同诊断治疗效果的一种或多种造影剂和药物很难同时且定量成比例的进入同一剂型，使得具有最佳治疗效果的纳米诊疗体系无法精确的控制制备。另外，载体基药物在体液环境中的分布和稳定性也面临着极大的挑战。随着癌症诊断和治疗业的发展，制备高载药量、尺寸均一且比例可控的多组分诊疗协同体系成为必要。

发明内容

本发明提供了一种制备诊疗协同纳米颗粒释放体系的方法，以达到使一种或多种造影剂和药物同时且定量成比例的进入同一剂型并精确控制制备具有最佳治疗效果的诊疗协同纳米颗粒释放体系的目的。

为了实现上述目的，本发明采用的技术手段如下：

模板法制备诊疗协同纳米颗粒释放体系的方法，包括如下步骤：

1）制备AAO模板；

2）制备诊疗协同纳米颗粒：对AAO模板进行表面改性处理；选择具有协同效应的疏水药物和成像造影剂，在有机溶剂中配制成浓度为1毫摩尔/升至饱和的诊疗协同溶液，将表面改性处理后的AAO模板浸泡在诊疗协同溶液中≥5分钟，取出硬模板晾干，重复浸泡和晾干步骤≥10次；

3）去除模板：用0.1-10mol/L的NaOH溶液、5wt%~50wt%的H₃PO₄溶液或磷酸+铬酸混合酸溶解去除模板；

4）纯化纳米颗粒：用水稀释并离心分离去除模板后的溶液，弃掉上层清液，得到单分散疏水诊疗协同纳米颗粒；

5)合成表面活性剂：以末端为氨基的聚乙二醇（以后简称：PEG）为亲水端，含有18个碳链长度的马来酸酐（以下简称PMHC18）作为疏水端，通过NH₂和COOH的缩合反应，制备PEG-PMHC18的两亲性表面活性剂；

6)制备诊疗协同纳米颗粒释放体系：将步骤4）所制备的诊疗协同纳米颗粒溶于水中，制得诊疗协同纳米颗粒水溶液；将步骤5）合成的表面活性剂溶于水中，制得表面活性剂水溶液；将诊疗协同纳米颗粒水溶液与表面活性剂水溶液混合，超声、震荡或机械搅拌使得两者通过疏水相互作用、静电作用和/或范德华力作用实现表面活性剂对诊疗协同纳米颗粒的稳定包裹，即纳米颗粒的功能化，制得诊疗协同纳米颗粒释放体系。

优选地，所述聚乙二醇的分子量为2000-20000。

优选地，步骤1）中，制备AAO模板的条件如下：取纯度≥99.999%的铝片并对其进行预处理，电解液为3wt%-20wt%的硫酸、磷酸或草酸溶液；加入适量乙醇调控模板的制备过程；氧化电压20-200V，氧化温度0-32℃，氧化时间为0.5-12小时。

优选地，上述预处理包括退火、去油渍、清洗和抛光步骤。

优选地，步骤2）中，疏水药物为一种或两种以上，成像造影剂为一种或两种以上。

优选地，步骤2）中，所述有机溶剂选自下列物质中的一种或几种：乙醇、丙酮、异丙醇、四氢呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜。