[发明专利]一种裸花紫珠中总酚的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药领域，具体涉及裸花紫珠中总酚含量测定方法。

背景技术

裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)为马鞭草科(Verbenaceae)紫珠属植物，主产于我国海南、广东、广西，是海南的道地药材，具有收敛、止血、镇痛、消炎等功效。现有上市品种如裸花紫珠片、裸花紫珠胶囊、裸花紫珠栓等制剂，目前多以总黄酮为质量控制标准，《广西植物》2012年11期《七种紫珠属植物水提物中总黄酮、总酚酸及其抗氧化活性的测定》记载了总酚的含量测定方法，但本发明提供的总酚含量测定方法，对提取条件和含量测定方法等方法学考察进一步研究，优化了相关参数，进一步提高了质量标准。

 

发明内容

本发明的目的是建立一种准确、可靠的裸花紫珠药材、提取物中总酚的含量测定方法。

本发明所述的裸花紫珠中总酚的含量测定方法包括下列步骤：

(1).供试品溶液的制备：

取裸花紫珠药材适量，用醇溶剂或酮溶剂超声提取，提取液离心，以上清液为供试品溶液；

(2).标准曲线的制作：精密称取没食子酸约10mg作为对照品，置10 ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为1 mg/ml的对照品储备液；精密移取1 ml对照品储备液置于10 ml容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.1 mg/ml的对照品溶液；再分别精密吸取对照品溶液置于5ml量瓶中配制成梯度的标准溶液，加入显色剂显色，以50%甲醇为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下，分别测定吸光度，以没食子酸含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得没食子酸含量测定标准曲线；

(3).样品溶液总酚的含量测定：精密量取0.1ml步骤（1）所述的供试品溶液，加入显色剂显色，以相应试剂为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下测定吸光度值，根据该吸光度值，由标准曲线得对应的浓度，该浓度值即为供试品溶液总酚的含量；

(4).药材中含量的计算：根据步骤（3）所得的供试品溶液中总酚的含量，换算出裸花紫珠药材中总酚的含量。

其中，步骤(1)供试品溶液的制备可优选为：醇溶剂为40~60%的甲醇或乙醇，酮溶剂为40~60%丙酮，超声提取的液料比为120:1~250:1，离心速率为10000~15000r/min，提取时间0.5~1.5h；可进一步优选为50%的丙酮超声提取，提取时间为1小时，液料比为250:1，提取液以10000r/min离心，离心1 min后，精密量取上清液1-5ml置25ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，制成供试品溶液。

本发明所述的一种裸花紫珠提取物中总酚的含量测定方法，包括如下步骤：

(1).供试品溶液的制备：

精密称取0.01~0.05g裸花紫珠提取物粉末，置25ml量瓶中，加50%甲醇10~20ml超声溶解，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，所得滤液制成供试品溶液；

(2).标准曲线的制作：精密称取没食子酸约10mg作为对照品，置10 ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为1 mg/ml的对照品储备液；精密移取1 ml对照品储备液置于10 ml容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.1 mg/ml的对照品溶液；再分别精密吸取对照品溶液置于5ml量瓶中配制成梯度的标准溶液，加入显色剂显色，以50%甲醇为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下，分别测定吸光度，以没食子酸含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得没食子酸含量测定标准曲线；

(3).样品溶液总酚的含量测定：精密量取0.1ml步骤（1）所述的供试品溶液，加入显色剂显色，以相应试剂为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下测定吸光度值，根据该吸光度值，由标准曲线得对应的浓度，该浓度值即为供试品溶液总酚的含量；

(4).提取物中含量的计算：根据步骤（3）所得的供试品溶液中总酚的含量，换算出裸花紫珠提取物中总酚的含量。

本发明所述的一种裸花紫珠固体制剂中总酚的含量测定方法，其特征在于包括如下步骤：

(1).供试品溶液的制备：

取裸花紫珠固体制剂，精密称取0.05~0.1g内部药物，粉碎，置25ml量瓶中，加50%甲醇10~20ml超声溶解，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，所得滤液制成供试品溶液；