[发明专利]酶处理提取锁阳多糖的方法及锁阳多糖抗肿瘤制剂的制备

说明书

技术领域

本发明涉及中药有效成分的提取方法，具体的涉及一种锁阳多糖的制备方法和锁阳多糖抗肿瘤制剂的制备。 

背景技术

锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)，又名铁棒槌、锈铁棒、地毛球、乌兰高腰(蒙语)，是锁阳科(Cynomoriaceae)锁阳属的单科单属单种植物，多寄生于蒺藜科(Zygophyllaceae)白刺属(Nityaria L)植物根部，全寄生种子植物，主产于甘肃、新疆、青海、宁夏、内蒙古等地，其中尤其以甘肃河西走廊地区分布最广。在中医上，把锁阳植物的去花序干燥茎用做传统的中药锁阳，又名“不老药”等。明代《本草纲目》记述：“锁阳性温，补肾，益精血，润燥养精治痿弱”。《本草原始》：“锁阳补阴血、祛虚火、兴阳固精、强阳益髓”，中医临床用锁阳补阳气，治阳痿精虚，阴衰血竭，老年气弱阴虚等。现代药理学研究证明，锁阳具有清除自由基、调节免疫等多种药理活性。 

多糖是锁阳重要的有效成分，具有提高免疫力，抗衰老，抗疲劳等多种活性。苏韫等研究表明锁阳多糖对D-半乳糖所致衰老模型大鼠脾脏病理变化、脾淋巴细胞免疫功能、自由基代谢相关指标等具有明显改善作用（可参考文献《锁阳对衰老模型大鼠脾淋巴细胞转化能力、脾病理学变化及血清SOD、MDA、NO水平的影响》，＜中国老年学杂志＞，2009年，第8期)。熊正英等研究结果表明锁阳多糖可以提高运动训练大鼠不同组织SOD（超氧化物歧化酶）和CAT(过氧化氢酶)活性，降低MDA（丙二醛）含量，延长大鼠跑台运动至力竭时间，具有抗疲劳作用（可参考文献《锁阳多糖对运动训练大鼠抗氧化水平与运动能力的影响》，＜辽东学院学报＞，2011年，第4期)。本发明人研究表明锁阳多糖 在体外对宫颈癌HeLa肿瘤细胞、结肠癌SW620肿瘤细胞有明显的生长抑制作用。 

目前关于锁阳多糖提取工艺已有较多研究，已公开的发明专利，授权公告号为CN 101580553 B，专利名称为《一种锁阳多糖的制备方法》，该专利的技术以中药锁阳为材料，采用以超声波辅助、微波高效提取锁阳多糖。已公开的发明专利，申请号为201210119296.X，专利名称为《一种从锁阳中制备锁阳萜和锁阳多糖的方法》，该专利的技术是将干燥的锁阳药材粉碎成粒状物进行超临界萃取提取锁阳萜和锁阳多糖。再如本行业的业类技术人员刘晔玮等以浸膏得率和浸膏中多糖质量分数综合评价，利用L₉(3³)正交实验，从水提和醇沉两方面优选锁阳中水溶性多糖的最佳提取工艺条件；（可参考文献《锁阳多糖提取工艺的研究》，＜天然产物研究与开发＞，2006年，1007-1009)。王晋等以锁阳多糖提取率为考察指标对水提醇沉提取锁阳多糖的工艺条件进行优化，锁阳多糖的提取最佳工艺：提取温度为90℃，料液比为1∶10，提取时间为2h；（可参考文献《不同条件对锁阳多糖提取率的影响》，＜内蒙古医学院学报＞，2008年，第6期，540-542)。李贵文等以多糖得率为指标，采用正交试验考察超声提取时间、提取温度、料液质量比、超声波功率４个因素对超声提取锁阳多糖的影响，筛选超声辅助提取锁阳多糖的最佳工艺；（可参考文献《超声辅助提取锁阳多糖的工艺优化》，＜甘肃农业大学学报＞，2011年，第5期，157-160)。罗光宏等采用水提醇沉法，利用L₉(3³)正交试验优选锁阳多糖的提取工艺，用硫酸苯酚比色法对甘肃河西沙区不同地区锁阳中多糖含量进行测定。提取最佳工艺条件为料液比1:15(g/mL)、提取时间90min、提取次数为2次，甘肃河西沙区不同地区锁阳多糖含量差别显著；（可参考文献《甘肃河西沙区锁阳多糖提取工艺优化及含量测定》，＜食品科学＞，2011年，第10期，79-83)。上述方法均对锁阳多糖提取工艺进行研究，为锁阳活性多糖的开发提供科学依据和实验基础，但是在工艺推广至工业化生产上仍存在以下不足：①传统水提法产率较低，提取时间较长，耗能较大，提取成本较高；②微波和超声波辅助提取锁阳多糖有提取时间短，提取率高的特点，但相对成本较高，并且目前适合于工 业生产的设备尚未成熟；③超临界萃取锁阳多糖具有原料利用率高，产品收率高等优点，但设备复杂，运行成本高。