[发明专利]一种科氏葡萄球菌选择性培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验领域，具体涉及一种科氏葡萄球菌选择性培养基及其制备方法。

背景技术

科氏葡萄球菌（Staphylococcus cohnii）属于葡萄球菌属(Staphylococcus)中的一种，为低毒力条件致病菌，感染后症状不典型，且呈现多重耐药现象，给临床诊断和治疗带来一定困难，高效可靠的检验方法已是必然需要。

目前科氏葡萄球菌的鉴别主要通过API Staph 葡萄球菌和微球菌鉴定系统，但是基于研究和药物试验，则缺乏专门的科氏葡萄球菌选择性培养基。

目前临床上普遍使用的葡萄球菌选择性培养基为甘露醇高盐琼脂（Manitol Salt Agar），用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。培养基成分为：蛋白胨、鸡蛋蛋白液、D-甘露醇、氯化钠、酚红、琼脂。金黄色葡萄球菌菌落为黄色，大肠杆菌和沙门氏菌菌落为无色。但是，该种培养基并不能选择性培养科氏葡萄球菌，其原因在于在目前的选择性培养基中，如果标本中混有其他葡萄球菌，则金葡菌比科氏葡萄球菌生长更快，很快覆盖了培养基，科氏葡萄球菌无法生长。

发明内容

本发明的技术任务是针对以上现有技术的不足，提供一种对科氏葡萄球菌分离率高的选择性培养基。

本发明解决其技术问题的技术方案是：一种科氏葡萄球菌选择性培养基，其特征在，配制1000ml选择性培养基的配方中含有：

麦芽浸粉15g；

鸡蛋蛋白液150ml；

氯化钠5g；

枸橼酸镁0.5g；

琼脂15g；

假细锥甲素8~12mg；

香草乙酮 0.5 g；

磷酸二氢钾0.2g；

蒸馏水加至1000ml。

优化方案中，每1000ml选择性培养基还含有硫酸铜5mg。

优化方案中，每1000ml选择性培养基还含有L-半胱氨酸0.1g。

优化方案中，每1000ml选择性培养基还含有浓度200g/L的百合水煮液200~300ml。

最优化方案中，每1000ml选择性培养基还含有硫酸铜5mg；L-半胱氨酸0.1g；浓度200g/L的百合水煮液200~300ml。

一种科氏葡萄球菌选择性培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）取百合加水煮沸1小时，过滤，取滤液，调整体积到浓度为200g/L，得百合水煮液；

（2）取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸橼酸镁；琼脂；假细锥甲素；香草乙酮；磷酸二氢钾；L-半胱氨酸及硫酸铜溶于步骤1所得百合水煮液中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，每次45 min，灭菌后分装。

其中所述的麦芽浸粉、鸡蛋蛋白液提供碳氮源和能量；枸橼酸镁和磷酸二氢钾为缓冲剂，并可以抑制杂菌生长；香草乙酮、L-半胱氨酸属氨基酸类，为营养剂，其中，香草乙酮为科氏葡萄球菌特异性营养剂，可以特异性的促进科氏葡萄球菌繁殖。；琼脂是选择性培养基的凝固剂；假细锥甲素对于金葡菌具有特异的抑菌作用，对于科氏葡萄球菌无效；鸡蛋蛋白液含有各种多肽、脂肪、生长因子、激素等，这些物质对促进科氏葡萄球菌的繁殖和生长都是很重要的因素，此外鸡蛋蛋白液还具有维持选择性培养基pH 值恒定的作用。铜离子属于重金属离子，在5mg/L这个浓度剂量下，沉积于金葡菌内部，导致胞壁消失或变薄，核糖体聚集成团块，最终导致细菌变形及破裂，呈现重金属源性损伤，而科氏葡萄球菌对重金属的运输能力和渗透能力低于金葡菌，也即重金属的抗性较高，故而加入硫酸铜可以有效地抑制金葡菌生长。百合为百合科植物卷丹Lilium lancifolium Thunb.、百合Lilium brownii F.E.Brown var. viridulum Baker 或细叶百合Lilium pumilum DC. 的干燥肉质鳞叶，含有蛋白质、脂肪、淀粉、还元糖、维生素B1、B2、泛酸、维生素C、β-胡萝卜素等多种成分，可以提供能量代谢、细胞发育、新陈代谢因子，有助于促进科氏葡萄球菌生长，尤其是重金属环境下菌落的生长。

本发明与现有技术相比较，具有检出可靠、科氏葡萄球菌分离率高的特点。

具体实施方式

以下结合实际情况，对本发明的具体实施方式作详细说明。