[发明专利]重组蛋白质、含有该重组蛋白质的医药组成物及该重组蛋白质的制备方法

说明书

技术领域

本发明是与重组蛋白质有关，特别是指一种含有生物活性胜肽的重组蛋白质、含有该重组蛋白质的医药组成物以及该重组蛋白质的制备方法。

背景技术

胜肽大小是介于胺基酸和蛋白质之间。胺基酸的分子最小，蛋白质最大，两个或以上的胺基酸脱水缩合形成若干个胜肽键从而组成一个胜肽，多个胜肽进行多次脱水缩合就组成一个蛋白质分子。相反的，蛋白质可以被蛋白水解酶水解为蛋白质片段，因此蛋白质也被称为「多胜肽」，胜肽可以小至有纳米般大小，肠胃，血管及肌肤皆极容易吸收。

胜肽从功能上可以区分为营养性胜肽以及功能性胜肽，营养性胜肽可提供动物或人体所需胺基酸的来源，功能性胜肽又称做生物活性胜肽，能够在动物或人体内造成特定的生理效果，且应用范围相当广泛。

目前生物活性胜肽的生产是利用不同的食用性蛋白，透过蛋白水解酶水解而得，又或是在生产少于5个胺基酸的短链胜肽时，用一个胺基酸黏接另一个胺基酸的方式而成。但是这些方式所生产的生物活性胜肽产量很少，造成产量不足而拉高制备成本的现象。所以当这些生物活性胜肽被制成药品、健康食品或化妆品原料的时候，一般厂商在考虑成本及售价下，所使用的浓度也未达到最佳有效剂量，从而无法显示出这些生物活性胜肽在人体中的功能性，亦无法提供预防或治疗疾病的用。

事实上，这些生物活性胜肽在起初筛选功能性时，是最有效的。从实验得知，在动物试验上也一样显示出最完美的功能性来，然而到了口服或应用在人体时，就无法显示出强而有力的功能性出来。究其原因，一方面是制造厂商在产品中所下的胜肽浓度太少所致；另一方面是因口服的胜肽在人体的消化道中已经被破坏殆尽。

先前，本发明人在中国台湾专利第I315341号「富含降三酸甘油脂的机能性胜肽的蛋白质生成方法」曾发表以淀粉水解酵素(α-amylase)为携带蛋白质，在食用菌中生产，一区插入一套「VVYP」胜肽，六区仅有六套胜肽，携带蛋白质含有胜肽的比例很低，仅有3％，蛋白质回收纯化是用Ni-NTA方法回收，回收过程含有重金属镍，会污染胜肽产物，并且又因为携带蛋白质中所携带的胜肽套数太少，导致产出的胜肽浓度低、生产时间长且仅能小量回收纯化，又有毒性，无法供给人体使用。

因此，如何解决胜肽产量太少的问题、提高胜肽的浓度，是目前胜肽产制技术中极重要的课题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种重组蛋白质、含有该蛋白质的医药组成物及该重组蛋白质的制备方法，以能让生物活性胜肽被巨量表现，以生产富含高浓度、高产量的生物活性胜肽蛋白，同时能有效降低其制备成本。

为实现上述目的，本发明提供的重组蛋白质，包含有：

至少一具有连续多套生物活性胜肽的区段，其中各该生物活性胜肽是选自由GHK、SEQ ID NO：2、3、4、5所组成的群组中任一种。

所述的重组蛋白质，其中，各该生物活性胜肽之间具有一胃蛋白酶(pepsin)切位。

所述的重组蛋白质，其中，各该生物活性胜肽之间具有一胰蛋白酶(trypsin)切位。

所述的重组蛋白质，其中，各该生物活性胜肽之间具有一羧肽酶B(carboxypeptidase B)切位。

所述的重组蛋白质，其中，该生物活性胜肽的套数为3～25套。

本发明提供的医药组成物，包含有如上所述的重组蛋白质。

所述的医药组成物，其中，该医药组成物的剂型为选自由乳剂、膏剂、凝胶、涂剂、糊状物、油剂、软化剂、脂肪体剂型、纳米颗粒、化妆水、漱口剂、洗发水、乳液、喷剂、塞剂、胶囊、锭剂、粉末、糖浆、颗粒、溶液、悬浮液、贴片或封闭型敷贴所组成的群组中任一种。

本发明提供的重组蛋白质的制备方法，包含有下列步骤：

(a)提供一蛋白质，该蛋白质具有至少一更改置换区段以及一淀粉吸附区段；

(b)将该更改置换区段与一具有连续多套生物活性胜肽的区段置换，其中各该生物活性胜肽系选自由GHK、SEQ ID NO：2、3、4、5所组成的群组中任一种；

(c)转殖置换后的该蛋白质至一酵母菌表现系统进行发酵；以及

(d)以淀粉纯化出该蛋白质。

所述的制备方法，其中，该蛋白质为人类酪氨酸羟化酶(human tyrosinehydroxylase)。

所述的制备方法，其中，该酵母菌为耶式酵母菌(Yarrowia lipolytica)。

所述的制备方法，还包含有下列步骤：