[发明专利]尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法

权利要求书

1.一种尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法，其特征在于，采用气相色谱质谱联用技术检测肺癌患者和健康对照者的尿液样本的代谢图谱，结合支持向量机的生物学方法，分别建立吸烟者肺癌代谢产物指纹图谱和非吸烟者肺癌代谢产物指纹图谱；吸烟者肺癌代谢产物指纹图谱由草酸、磷酸、尿嘧啶、苏氨酸、5-氧脯氨酸、柠檬酸和半乳糖组成或者由磷酸、尿酸、柠檬酸和草酸组成；非吸烟者肺癌代谢产物指纹图谱由丙氨酸、草酸、磷酸、尿嘧啶、丝氨酸、苏氨酸、5-氧脯氨酸、核糖、顺乌头酸、柠檬酸、半乳糖、酪氨酸、软脂酸和硬脂酸组成。

2.根据权利要求1所述的尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述的气相色谱质谱联用技术的参数设置包括：进样口温度270℃±5℃；无分流进样；载气：氦气；载气流速：1.0mL/min；升温程序：柱始温85℃±5℃保持5min±1min，以8℃/min程序升温至125℃±5℃保持7min±1min，以10℃/min程序升温至190℃±5℃保持10min±1min，以10℃/min程序升温至300℃±5℃保持5min±1min。

3.根据权利要求1所述的尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述的尿液样本预处理后采用气相色谱质谱联用技术检测，所述的尿液样本预处理的方法包括：

取尿液样本，加入脲酶水溶液，混合均匀并水浴孵育后加入内标戊五醇水溶液和丙酮，充分混匀后离心分离，吸取上清液离心浓缩挥干溶剂，再加入甲氧胺吡啶溶液，混匀后于65℃-75℃下肟化0.9h-1.1h，然后加衍生化试剂，混匀后静置，最后加入正庚烷，混匀后离心，吸取上清液供气质分析；

所述的衍生化试剂为N-甲基-N-(三甲基硅烷)三氟乙酰胺和三甲基氯硅烷。

4.根据权利要求3所述的尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述的尿液样本、脲酶水溶液、戊五醇水溶液和丙酮的体积比为1:0.08-0.12：0.08-0.12：1.8-2.2。

5.根据权利要求4所述的尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述的尿液样本、脲酶水溶液、戊五醇水溶液和丙酮的体积比为1:0.1：0.1：2。

6.根据权利要求3所述的尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述的脲酶水溶液的浓度为80mg/ml；所述的戊五醇水溶液的浓度为0.3mg/ml。

7.根据权利要求3所述的尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述的N-甲基-N-(三甲基硅烷)三氟乙酰胺和三甲基氯硅烷的体积比为100:1。

8.一种尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱，其特征在于，所述的尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱为采用权利要求1-7任一项所述的尿液中肺癌特征代谢产物指纹图谱的检测方法得到的代谢产物指纹图谱。