[发明专利]一种无血清成纤维细胞培养基及其制备方法有效
申请号: | 201310003115.1 | 申请日: | 2013-01-06 |
公开(公告)号: | CN103911339A | 公开(公告)日: | 2014-07-09 |
发明(设计)人: | 贺晓静 | 申请(专利权)人: | 陕西博鸿生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 710065 陕西省西安市南*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 血清 纤维 细胞 培养基 及其 制备 方法 | ||
1.一种无血清成纤维细胞培养基,是由基础培养基与外源添加物组成,其特征在于,基础培养基为DMEM培养基,或DMEM培养基与F12培养基的混合培养基;外源添加物包括激素、转金属蛋白、谷氨酰胺、脂类浓缩剂、抗氧化剂、嘌呤、糖类和细胞生长因子。
2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述的混合培养基按体积比DMEM培养基为1~3份、F12培养基为1份。
3.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述的外源添加物为:胰岛素或胰岛素样生长因子为1~20 mg/L,转铁蛋白为1~20 mg/L,谷氨酰胺为1~10 mM,三碘甲状腺氨酸为0.01~5μM,氢化可的松为0.01~5mg/L,地塞米松为0.01~10μg/L,乙醇胺为5~30μM,腺嘌呤为5~30 mg/L,葡聚糖为10~30g/L,亚硒酸钠为1~15μg/L,2-巯基乙醇为50~100μM,VE为2~20mg/L,VC为2~50mg/L,脂类浓缩剂为1mL/L,bFGF为1~50μg/L,EGF为1~10μg/L,TGF-β为1~10μg/L,PDGF为1~10μg/L。
4.制备权利要求1所述的无血清成纤维细胞培养基的方法,其特征在于,采用超纯水配制基础培养基;在基础培养基中先加入葡聚糖搅拌溶解,再分别加入三碘甲状腺氨酸、氢化可的松、地塞米松、腺嘌呤、亚硒酸钠、2-巯基乙醇、VE、VC、脂类浓缩剂、谷氨酰胺、乙醇胺、bFGF、EGF、TGF-β、PDGF、胰岛素或胰岛素样生长因子、转铁蛋白;调pH至7.2,定容后用滤膜过滤除菌,4℃保存。
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