[发明专利]棕点石斑鱼与鞍带石斑鱼的一种工厂化杂交育种方法

说明书

  

技术领域  

本发明涉及棕点石斑鱼与鞍带石斑鱼的一种杂交育种方法。

    背景技术  

棕点石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)又称褐点石斑鱼,俗称老虎斑、虎头斑,为暖水性岛礁性鱼类，在我国主要分布于东海和南海,资源量比较稀少。由于其肉味鲜美、生长快、市场潜力大,养殖前景看好。鞍带石斑鱼（Epinephelus lanceolatus），俗名龙胆石斑，又称紫石斑，为暖水性海洋底层鱼类，是石斑鱼类中体型最大的种类之一，有斑王之称，主要产地是东南亚、澳洲水域以及我国南海（南沙群岛）、台湾附近海域。鞍带石斑鱼种苗来源稀少，市场售价昂贵，而且该种鱼生长迅速、抗病力强。

棕点石斑鱼肉质鲜美，生长速度和抗病能能力并不突出，而鞍带石斑鱼生长速度快、抗病力强，但肉质不及棕点石斑鱼。根据遗传学特性，品种间的杂交技术可以实现两种鱼优势性状的集成。 

目前国内已有开展棕点石斑鱼与鞍带石斑鱼的一种工厂化杂交育种方法的研究，但国内人工繁殖操作技术并不完善，苗种成活率低，产量不稳定，成为养殖产业发展的瓶颈。 

发明内容

本发明的目的在于提供棕点石斑鱼与鞍带石斑鱼的一种工厂化杂交育种方法，所要解决的技术问题：一是构建工厂化环境下棕点石斑鱼与鞍带石斑鱼亲鱼人工促熟技术，以调节棕点石斑鱼和鞍带石斑鱼性成熟时间，解决棕点石斑鱼和鞍带石斑鱼发育受外界环境限制问题；二是构建棕点石斑鱼精子超低温冷冻技术，保存鞍带石斑鱼精液，解决因棕点石斑鱼和鞍带石斑鱼因性成熟时间不一致，受精困难的问题；三是构建受精卵臭氧消毒技术，进行臭氧消毒，有效切断细菌、病毒性疾病从受精卵到苗种的垂直传播。 

本发明的技术方案如下： 

棕点石斑鱼与鞍带石斑鱼的一种工厂化杂交育种方法，其特征在于：

1）、亲本筛选：杂交育种选择6~10龄鞍带石斑鱼作为雄性亲本，4~5龄棕点石斑鱼作为雌性亲本；

2）、亲本培育：将雌雄亲本分别放养于不同亲鱼培育池内，每池放养5~10尾；棕点石斑鱼养殖水温保持在20~38℃，鞍带石斑鱼养殖水温保持在20~30摄氏度；亲本饵料为鲐鱼、鲅鱼的任一种或者两种的任意比例混合投喂，水温≥24℃时2天投喂1次，20~23℃时每周投喂2次，每次投喂量占鱼体体重的1%；

3）、人工促熟技术：通过调控亲鱼培育的水温度，控制育苗时间在每年6月份，措施为：从第一年的12月份开始，亲鱼培育水温从23℃逐步降低至20℃再逐步升温至25℃不再升高，升温和降温频率控制在每20天升高或降低1℃；至第二年5月份准备繁殖时，鞍带石斑鱼亲鱼从25℃升温至30℃不再升高，升温频率每3天升高1℃；棕点石斑鱼从25℃升温至28℃不再升高，升温频率每3天升高1℃；

4）、营养强化：营养强化选择在第二年2月份进行，强化时间选择亲鱼培育水温由最低值开始上升的过程中进行，营养强化包括增加鱿鱼、维生素C、维生素E、裂壶藻；

5）、精子超低温冷冻保存：第二年5~6月份开始进行鞍带石斑鱼精子超低温冷冻保存，通过镜检的方式确定雄鱼发育及精子质量情况，选择发育成熟、成活率达到95%以上的精子进行超低温冷冻保存；按照精子与冷冻稀释液体积比1:1将精子加入到冷冻稀释液中，一并置于液氮中保存备用；其中冷冻稀释液的配比是：每升葡萄糖24g，氯化钠8g，碳酸氢钠0.08g，二甲基亚砜10mL，胎牛血清10mL，余量为去离子水；

6）、雌性亲本催产：第二年5月份开始对棕点石斑鱼雌鱼进行镜检，挑选腹部明显膨胀，卵巢发育至Ⅳ期的雌鱼放养在培育池内，水温维持28℃；对棕点石斑鱼雌鱼进行药物注射催产，注射所用催产剂配置方法：取400 ~800IU/kg鱼体重的HCG和2~3ug/kg鱼体重的LRH- A3，混合后加0.9%的生理盐水2ml/条鱼溶解；将催产剂一次性进行鱼体注射，注射部位为背部肌肉。注射后效应时间约为36小时；

7）、人工授精：对催产后腹部柔软轻压有透明卵流出的棕点石斑雌鱼，进行人工挤卵，使用玻璃或塑料容器接收；将鞍带石斑鱼冷冻精液在37℃水浴中快速复温解冻，按照精、卵数量比1：1000的比例混合均匀，干法授精，将受精卵放在孵化槽内，孵化20小时左右，收集上浮发眼卵。