[发明专利]一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法

权利要求书

1.一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）竹荪水提残渣的制备：将干燥的竹荪磨碎，过80-100目筛得竹荪粉末；

称取一定质量的竹荪粉末并加入40-50倍蒸馏水，搅拌均匀后用普通高压锅提取1-2小时，过滤，滤渣重复上述提取步骤1-2次，过滤获得竹荪水提残渣；

（2）多糖提取液的配置：配制5%NaOH/0.05% NaBH₄ 的混合碱溶液；

（3）竹荪水提残渣中多糖的提取：取一定量的竹荪水提残渣加入混合碱提液进行提取，用双层滤布过滤，滤液浓缩到原来体积的1/3-1/5后即得竹荪水提残渣的多糖提取液；

（4）多糖提取液中水不溶性α-(1→3)-d-葡聚糖的去除：搅拌过程中加入冰乙酸，调节提取液的pH至6-7，离心去除α-(1→3)-d 型不溶的沉淀，上清液即为所需的β-D-葡聚糖；

（5）脱色：上清液用25-30%H₂O₂进行脱色；

（6）小分子杂质的去除：将脱色后的糖液浓缩到原来体积的1/3-1/4，彻底透析，透析液浓缩到原来体积的1/5-1/7后离心去除去沉淀，获得纯净的多糖浓缩液；

（7）多糖的纯化：把多糖浓缩液稀释到浓度为1-2%，按等体积往溶液中缓慢加入预冷分析纯丙酮，搅拌下将该混合液缓慢升温至45-50℃，保持2-3 h后，立即离心分出沉淀物；

（8）透析与冷冻干燥：把沉淀溶于蒸馏水中，用截留分子量3500 Da的透析袋先对自来水透析3-4天，后用重蒸水透析2-3天；透析液浓缩后冷冻干燥即得干燥的竹荪多糖；

（9）抗氧化活性检测：取冻干的竹荪多糖进行体外清除·OH、O₂^.-、H₂O₂及DPPH的抗氧化试验。

2.根据权利要求1所述的一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中混合碱提液的加入量为竹荪水提残渣的20-25倍，提取温度为25-30℃，提取时间为1-2 h，提取次数为2-3次。

3.根据权利要求1所述的一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中乙酸的浓度为1-1.5 mol/L，离心机转速5000-8000 rpm，离心时间为15-30 min。

4.根据权利要求1所述的一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤（5）中加入H₂O₂的量为总体积的1/7-1/10，然后加热到40-50℃，保持2-3 h。

5.根据权利要求1所述的一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤（6）中透析袋规格为3500 Da，自来水水透析5-6天，蒸馏水透析3-4天，离心机转速为8000-10000rpm，离心时间为10-15 min。