[发明专利]7S大豆抗原蛋白注射液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种7S大豆抗原蛋白注射液及其制备方法。

背景技术

大豆在我国普遍种植，具有价格便宜，蛋白质含量高等特点，是畜禽业生产中最主要的蛋白质来源。然而，大豆中存在的抗原蛋白物质能引起人和动物尤其是在婴幼儿和幼龄动物中引发过敏反应导致腹泻甚至死亡，造成重大的损失。据报道，β-伴大豆球蛋白（β-Conglycinin）和大豆球蛋白（Glycinin）是引起动物致敏的主要成分，分布于大豆种子的子叶中。β-伴大豆球蛋白，简称7S蛋白，是由非共价键形成稳定的三聚体糖蛋白，相对分子量为180 kD，含α，α’和β三个亚基。大豆球蛋白，简称11S蛋白，分子量为350 KD，由6个亚基组成，每个亚基由一个酸性肽链和一个碱性肽链通过一个二硫键连接起来。这两种组分约占大豆蛋白的70%左右，是引起过敏反应的主要抗原蛋白，也是国内外学者对食源性过敏反应的主要研究对象。目前，大多研究使用膨化、热乙醇变性法、热加工法等处理方法，使致敏因子变性失活；或通过改善酶的作用条件，优化酶制剂的组合，利用外源酶对7S大豆抗原蛋白进行酶解从而去除抗原蛋白；或使用蛋白质糖基化工程对蛋白质表面的糖链进行改造，来改良蛋白质性质；或利用基因敲除的方法使某些基因无法表达，从而消除大豆中的致敏因子。这些方法不能完全去除致敏物质，而且去除条件要求高，成本增加，虽然有新品种培育出，但需要复杂的食品安全评估过程和农业推广问题，导致其无法在生产实践中得到广泛应用。因此实现从动物体的过敏反应出发，探索出一种可以保护动物免受7S大豆抗原蛋白物质危害的方法，不但能够减少经济损失，而且可以有效的控制该病的发生，具有长远的社会效益。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种7S大豆抗原蛋白注射液。

本发明是通过以下技术方案来实现的。

一种7S大豆抗原蛋白注射液，按照体积百分比计，其包括以下组分：纯化后的7S大豆抗原蛋白40%~60%，氢氧化铝胶体40%~60%。

进一步地，按照体积百分比计，其包括以下组分：纯化后的7S大豆抗原蛋白50%，氢氧化铝胶体50%。

一种制备上述7S大豆抗原蛋白注射液的方法，包括步骤：

将7S蛋白纯化，以AlCl₃、NaOH通过沉淀法获得氢氧化铝胶体，将纯化后的7S大豆抗原蛋白、氢氧化铝胶体混匀乳化后获得7S大豆抗原蛋白注射液。

进一步地，上述7S蛋白的纯化包括：将7S蛋白溶于pH不小于7.4的磷酸盐缓冲液，凝胶过滤，用磷酸盐缓冲液洗脱得到的洗脱液经透析得纯化的7S大豆抗原蛋白。

进一步地，上述氢氧化铝胶体获得包括：无水AlCl₃加入到去离子水中，与适量NaOH反应，沉淀用去离子水反复洗涤若干次，离心得到氢氧化铝胶体。

进一步地，上述氢氧化铝胶体获得后110~120 ℃灭菌20~40 min。

进一步地，上述7S大豆抗原蛋白、氢氧化铝胶体混匀先用涡旋机混匀，再超声混匀。

本发明的有益效果：

（1）本发明能有效预防动物对大豆及其饲料的食入性过敏，解决了动物对7S蛋白食入性过敏的危害。

（2）具有较好的稳定性和水溶性无需苛刻的储存条件，使用方便。

（3）制备工艺简单可行，已具备扩大生产的条件和技术，更易实现产品化。

（4）简单易行，操作方便，利于推广。

总之，本发明的7S大豆抗原蛋白注射液具有针对性强，缓释性高，效果显著等特点，可用于预防临床上动物对大豆及其饲料的食入性过敏问题，有望解决豆制品的食入性过敏带来的危害。本发明具有制备方法简单，便于储存，便于操作，易于工业化生产等优点。

具体实施方式

下面根据实施例对本发明作进一步详细说明。

总体而言，本发明的7S大豆抗原蛋白注射液的制备包括：

（1）抗原的纯化及纯度分析

纯化：将7S蛋白溶于pH为7.4的磷酸盐缓冲液，Sepharose CL-6B凝胶过滤(l.6×120 cm层析柱)，用磷酸盐缓冲液洗脱得到的洗脱液经透析得7S蛋白，储存于-20℃作为抗原备用。