[发明专利]人脐带组织来源的细胞的检测

说明书

本发明涉及用于检测血液中的同种异体治疗细胞（例如人脐带组织来源的细胞（hUTC））的方法。该方法包括以下步骤：鉴定对于同种异体治疗细胞（例如hUTC）阳性的一种或多种标志物和对于人外周血单核细胞（PBMC）阳性的一种或多种标志物；提供来自已用同种异体治疗细胞（例如hUTC）治疗的患者的血液样本，使用测定方法来分析样本，以检测对于PBMC阳性的一种或多种标志物和对于同种异体治疗细胞（例如hUTC）阳性的一种或多种标志物；以及区别PBMC和对于同种异体治疗细胞（例如hUTC）阳性的一种或多种标志物。在一个实施例中，细胞是hUTC，并且对于hUTC阳性的标志物包括CD10和/或CD13，且对于PBMC阳性的一种或多种标志物包括CD45。

相关申请的交叉引用

本申请要求美国临时申请61/579,710(提交于2011年12月23日)的优先权，所述美国临时申请以引用的方式全文并入。

技术领域

本发明涉及在来自用治疗细胞治疗的患者的样本中，检测同种异体治疗细胞例如人脐带组织来源的细胞的方法。

背景技术

同种异体细胞疗法是有希望的用于治疗许多未满足的医学需要的新技术。然而，细胞疗法是独特产品，并且对开发过程提出一些独特挑战。这种技术的一个具体实例是用于许多临床适应症的人脐带组织来源的细胞(“hUTC”)的开发。在hUTC施用于受试者后，测量在受试者的血液中检测到的细胞的存在和/或数目是与hUTC作为细胞治疗产品的药代动力学有关的期望信息。然而，这提出挑战，因为hUTC可具有类似于由受试者的血液收集的细胞的特征。因此，需要区别hUTC与其他细胞。

在药物开发过程中的临床研究包括药代动力学，以检查药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄参数。药代动力学研究的重要元素是测定药物在受试者中的暴露水平。通常，这通过分析来自血液样本的药物水平来完成；暴露水平相对于功效和安全结果进行评估。在细胞治疗产品例如hUTC的情况下，在临床试验中研究hUTC的生物分布或药代动力学呈现了挑战，因为不存在区别hUTC(或其他细胞产品)与受试者自身的细胞的确定方法。因此，难以测定hUTC的生物利用度。

目前公认的用于测定同种异体治疗细胞(例如hUTC)是否存在于循环中的方法需要使用来自男性供体的同种异体治疗细胞(例如hUTC)并且静脉内输液到女性受试者内。参见例如Bader P.等人，“How and when should we monitor chimerism after allogeneicstem cell transplantation？”Bone Marrow Transplantation，2005；35:107-119；还参见Durnam,DM等人，“Analysis of the origin of marrow cells in bone marrowtransplant recipients using a Y-chromosome-specific in situ hybridizationassay”，Blood，1989；74:2220-2226。实时PCR用于检测受试者的血液样本中的Y染色体，并且结果提供了指示血液样本中同种异体治疗细胞(例如hUTC)的存在或不存在的相对定量或二元信号。参见Bader P.等人。这种方法必须将女性细胞(例如hUTC)供体和男性受试者排除关于临床研究中的hUTC药代动力学的分析。因此，存在在细胞施用后用于检测患者中的同种异体细胞例如UTC的方法的需要。

发明内容

本发明提供了检测人外周血单核细胞的样本中的同种异体治疗细胞的存在。本发明允许检测此类治疗细胞而不受治疗细胞核型(XY相对于XX)和接受者(患者)性别约束。