[发明专利]来自人类脐带组织衍生的细胞的诱导性多能干细胞

权利要求书

1.一种包含重编程的人类脐带组织衍生的细胞的诱导性多能干细胞，其中所述人类脐带组织衍生的细胞是从基本上不含血液的人类脐带组织中分离的经分离的脐带组织细胞，所述脐带组织细胞能够在培养中自我更新和扩增，具有分化成其他表型的细胞的潜能，可在培养中经历至少40次的倍增，在传代时保持正常核型，并且具有下述特征：表达CD10、CD13、CD44、CD73、CD90、PDGFr-α、PD-L2和HLA-A、B、C中的每一种；不表达CD31、CD34、CD45、CD80、CD86、CD117、CD141、CD178、B7-H2、HLA-G或HLA-DR、DP、DQ中的任一种；以及相对于成纤维细胞、间充质干细胞或髂嵴骨髓细胞的人类细胞的表达，对于白细胞介素8、浆膜蛋白1和趋化因子（C-X-C基序）配体3中的每一种的增加的基因表达。

2.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞，其中所述人类脐带组织衍生的细胞还具有下述特征：分泌因子MCP-1、MIP1β、IL-6、IL-8、GCP-2、HGF、KGF、FGF、HB-EGF、BDNF、TPO、RANTES和TIMP1中的每一种；以及不分泌因子SDF-1α、TGF-β2、ANG2、PDGFbb、MIP1a和VEGF中的任一种。

3.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞，其中所述诱导性多能干细胞表达TRA1-60、TRA1-81、SSEA3、SSEA4和NANOG。

4.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞，其中所述诱导性多能干细胞对于碱性磷酸酶染色是阳性的。

5.根据权利要求1所述的诱导性多能干细胞，其中所述诱导性多能干细胞分化成外胚层、中胚层和内胚层谱系的细胞。

6.一种诱导性多能干细胞，所述诱导性多能干细胞由包括下述步骤的方法制备：

提供人类脐带组织衍生的细胞，其中所述人类脐带组织衍生的细胞是从基本上不含血液的人类脐带组织中分离的经分离的脐带组织细胞，所述脐带组织细胞能够在培养中自我更新和扩增，具有分化成其他表型的细胞的潜能，可在培养中经历至少40次的倍增，在传代时保持正常核型，并且具有下述特征：表达CD10、CD13、CD44、CD73、CD90、PDGFr-α、PD-L2和HLA-A、B、C中的每一种；不表达CD31、CD34、CD45、CD80、CD86、CD117、CD141、CD178、B7-H2、HLA-G或HLA-DR、DP、DQ中的任一种；以及相对于成纤维细胞、间充质干细胞或髂嵴骨髓细胞的人类细胞的表达，对于白细胞介素8、浆膜蛋白1和趋化因子（C-X-C基序）配体3中的每一种的增加的基因表达；

利用单个地携带组成性表达的人类转录因子OCT4、SOX2、KLF4和c-MYC的鼠逆转录病毒来转染所述人类脐带组织衍生的细胞，

培养所述经转染的人类脐带组织衍生的细胞，

鉴定诱导性多能干细胞，

分离所述人类脐带组织衍生的IPS细胞，

传代培养所述诱导性多能干细胞，

以及提供诱导性多能干细胞。

7.根据权利要求5所述的方法，其中所述鼠逆转录病毒还携带p53-shRNA。