[发明专利]抗sPLA2-X 抗体和其用途

说明书

技术领域

本发明涉及新颖的针对人X型分泌型磷脂酶A2(sPLA2-X)的抗体和其在诊断和治疗方法中的用途。

背景技术

分泌型磷脂酶A2(sPLA2)形成了结构相关的酶的一个家族，这些酶催化磷脂的sn-2脂肪酰基键发生水解，从而释放游离脂肪酸和溶血磷脂。通过催化这个反应，sPLA2酶在多种生物过程中发挥关键作用，所述生物过程包括细胞膜的稳态平衡、脂质消化、宿主防御、信号转导和脂质介体(例如类二十烷酸和溶血磷脂衍生物)产生(Valentin等人2000,Bioch.Biophys.Act.59-70；Lambeau,G.和Gelb,M.H.2008,Annu.Rev.Biochem.77,495-520)。这个家族包括11个成员/同种型，命名为sPLA2-IB、sPLA2-IIA、sPLA2-IIC、sPLA2-IID、sPLA2-IIE、sPLA2-IIF、sPLA2-III、sPLA2-V、sPLA2-X、sPLA2-XIIA和sPLA2-XIIB。

在蛋白质层面对具体同种型的定量已被证明是困难的，因为酶活性是类似的并且不存在同种型特异性sPLA2抗体。

Nevalainen等人开发了一种针对sPLA2-X的抗体，其应用在时间分辨荧光免疫分析(TR-FIA)中。这种多克隆抗体是通过用重组人类sPLA2-X蛋白对兔进行免疫来获得的。TR-FIA的分析灵敏度被描述为2 ng/ml。在来自脓毒性休克患者和健康血液供体的血清样品中分析sPLA2-X水平：作者发现，在两种类型的样品中，sPLA2-X的血清浓度都低于所述测试的分析灵敏度。

Santa Cruz Biotechnology以编号sc-365730提供了一种单克隆抗体H-9。根据发明人所获得的实验结果，H-9抗体具有约9.10^-9 M的结合人类sPLA2-X的Kd(参看实施例)。

当前需要针对sPLA2-X的抗体，其允许对生物样品、例如血清样品中的sPLA2-X进行更精确且更灵敏的检测。

发明内容

本发明的一个目的是一种针对人类sPLA2-X的分离抗体，其中所述抗体具有小于10^-9M的结合人类sPLA2-X的Kd。

在一个实施方案中，所述针对人类sPLA2-X的分离抗体包含：重链可变区，所述重链可变区包含至少一个以下CDR：

VH-CDR1:GFTFSN(SEQ ID NO:1)或GYTFTN(SEQ ID NO:2)；VH-CDR2:TISSGGDDTY(SEQ ID NO:3)或WIKTNTGEPT(SEQ ID NO:4)；和

VH-CDR3:PQLGP(SEQ ID NO:5)或GNYYRPRRYFDY(SEQ ID NO:6)，

或具有与SEQ ID NO:1-6具有至少60％同一性的氨基酸序列的任何CDR，

或其中轻链可变区包含至少一个以下CDR：

VL-CDR1:RSSKSLLHSNGITYLY(SEQ ID NO:7)或RASENLYSNLA(SEQ ID NO:8)；

VL-CDR2:YMSNLAS(SEQ ID NO:9)或AATNLAD(SEQ ID NO:10)；和

VL-CDR3:MQSLEYPLT(SEQ ID NO:11)或QHFYVTPYT(SEQ ID NO:12)，

或具有与SEQ ID NO:7-12具有至少60％同一性的氨基酸序列的任何CDR。

在另一个实施方案中，所述针对人类sPLA2-X的分离抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含上文所定义的CDR中的至少一个并且所述轻链可变区包含上文所定义的CDR中的至少一个。

在另一个实施方案中，所述针对人类sPLA2-X的分离抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含上文所定义的CDR并且所述轻链可变区包含上文所定义的CDR。