[发明专利]抗HER3的结构域III和结构域IV的表皮生长因子受体3(HER3)抗体

权利要求书

1.识别HER3受体的非线性表位的分离的抗体或其片段，其中非线性表位包含HER3受体的结构域3内的氨基酸残基，其中抗体或其片段结合包含至少一个选自结合表面B的氨基酸残基的结合表面，且其中抗体或其片段阻断配体依赖性和非配体依赖性信号转导二者。

2.权利要求1的分离的抗体或其片段，其中结合表面B包含至少一个选自氨基酸残基335-342、398、400、424-428、431、433-434和455的氨基酸残基。

3.权利要求1的分离的抗体或片段，其中抗体或其片段进一步与结合表面A结合。

4.权利要求3的分离的抗体或其片段，其中结合表面A包含至少一个选自氨基酸残基362-376的氨基酸残基。

5.识别HER3受体的非线性表位的分离的抗体或其片段，其中非线性表位包含HER3受体的结构域3内的氨基酸残基，其中抗体或其片段结合包含至少一个选自结合表面A的氨基酸残基和至少一个选自结合表面B的氨基酸残基的结合表面，且其中抗体或其片段阻断配体依赖性和非配体依赖性信号转导二者。

6.权利要求5的分离的抗体或其片段，其中抗体或其片段阻断HER3受体上的HER3配体结合。

7.权利要求6的分离的抗体或其片段，其中HER3配体选自神经调节蛋白1(NRG)、神经调节蛋白2、β动物纤维素、肝素结合表皮生长因子和表皮调节素。

8.权利要求5的分离的抗体或其片段，其中抗体或其片段具有选自以下的任意一种特征：结合HER3受体的失活态；由于抗体或其片段和HER3的结构域之间的位阻而阻止HER3采用活性构象；通过降低结构域3中的柔性程度阻止HER3采用活性构象；在结构域3残基371-377中诱导阻止HER3采用活性构象的构象变化；去稳定化HER3使得它易于降解；加速细胞表面HER3的下调；以及产生易于蛋白酶解降解或不能与其他受体酪氨酸激酶二聚化的非天然HER3二聚体。

9.权利要求5的分离的抗体或其片段，其中结合表面A包含氨基酸残基362-376。

10.权利要求5的分离的抗体或其片段，其中结合表面B包含氨基酸残基335-342、398、400、424-428、431、433-434和455。

11.权利要求5的分离的抗体，其中非线性表位包含氨基酸残基335-342、362-376、398、400、424-428、431、433-434和455(结构域3内)，或其子集。

12.权利要求5的分离的抗体，其中抗体或其片段的VH结合以下HER3残基中的至少一个：Ile365、Thr366、Asn369、Gly370、Asp371、Pro372、Trp373、His374、Lys375、Gln400和Lys434。

13.权利要求5的分离的抗体，其中抗体或其片段的VL结合以下HER3残基中的至少一个：Gly335、Ser336、Gly337、Ser338、Phe340、Gln341、Asp362、Leu364、Ile365、Thr366、His374、Ile376、Asn398、Gln400、Tyr424、Asn425、Arg426、Phe428、Leu431、Met433、Lys434、Tyr455。

14.权利要求5的分离的抗体或其片段，其中抗体或其片段在缺乏HER3配体的情况下与HER3受体的结合减少了表达HER2和HER3的细胞中HER2-HER3蛋白质复合物的非配体依赖性形成。

15.权利要求5的分离的抗体或其片段，其中通过HER3非配体依赖性磷酸化测定评估抗体或其片段抑制HER3的磷酸化。

16.权利要求15的分离的抗体或其片段，其中HER3非配体依赖性磷酸化测定使用HER2扩增的细胞，其中HER2扩增的细胞是SK-Br-3细胞和BT-474。

17.权利要求5的分离的抗体或其片段，其中抗体或其片段在HER3配体的存在下与HER3受体的结合减少了表达HER2和HER3的细胞中HER2-HER3蛋白质复合物的配体依赖性形成。