[发明专利]细胞分离容器

说明书

技术领域

本发明涉及一种细胞分离容器。

背景技术

近年来，在生物体外(in vitro)培养细胞，为了治疗而将培养出的细胞植入到患者身上，或者利用于医药品等的毒性试验的细胞培养技术在各种领域得到利用。这种细胞培养技术自古以来一直进行，但其工序几乎都是人工进行的手动操作，作业者的负担大，希望使操作简单化或者自动化。尤其是在作为细胞培养的初期工序的从生物体组织中分离出细胞的工序中，需要对从患者或者供体采取的生物体组织进行清洗、消毒，或者用含有酶的液体进行处理而从生物体组织中分离出细胞这多种操作，给作业者带来极大的负担。

为此，例如在专利文献1中提出了如下的细胞分散装置，其具备：组织保持部，至少在一部分具有大小为细胞能够通过的多个细胞通过孔并能够保持生物体组织；液体貯留部，构成为包围组织保持部并能够貯留浸渍由组织保持部保持的生物体组织的分散剂含有液；以及水流发生部，使分散剂含有液发生水流，在貯留在液体貯留部的分散剂含有液的作用下，使从生物体组织分离出的细胞从组织保持部的细胞通过孔向组织保持部的外侧通过。在该细胞分散装置中，由于代办了在使细胞从生物体组织中分离、分散之际的手动操作，所以能够通过分散剂简单地进行从生物体组织中分离、分散细胞的处理。

专利文献1：日本国专利第4520855号公报。

但是，在上述的装置中，由于分散剂含有液不仅需要貯留在进行细胞分散处理的组织保持部，还需要将充分量的分散剂含有液貯留到貯留液体貯留部进行处理，因此存在液量必须要多等不经济的一面。

发明内容

本发明是为了解决这种问题而提出的，其主要目的在于提供一种用处理液对组织片进行处理，能够简便而高效地进行分离细胞的一系列的操作的细胞分离容器。而且，其目的还在于为即使是手动操作也能够容易地进行细胞分离处理的构造。

为了实现上述的主要目的，本发明的细胞分离容器采用了以下的手段。

即、本发明的细胞分离容器使用处理液将细胞从组织片中分离，其中具备：

收集室，收集前述处理液以及前述细胞中的至少一种；

组织保持室，设在前述收集室的上方，具备用于投入前述处理液的投入口；

过滤器，作为区分出前述收集室和前述组织保持室的结构的全部或者一部分地设置，能够保持前述组织片，并且前述细胞能够通过；

气压调节机构，通过对前述收集室和前述组织保持室的各气体的流入流出进行调节，能够将投入到前述组织保持室中的处理液切换成不通过前述过滤器而保持在前述组织保持室中，或者通过前述过滤器而向前述收集室排出。

在该细胞分离容器中，通过对收集室和组织保持室的各气体的流入流出进行调节，不仅能够在组织保持室内对组织片进行处理时，控制成处理液保持在组织保持室中，也能够在处理液的处理结束后，以组织保持室中保持着组织片及残渣的状态将处理液以及细胞容易地向收集室排出。这样，能够简便地以必要的最小限度的液量高效率地用处理液对组织片进行处理、排出处理后的处理液这一系列的操作。

在此，作为组织片，优选是从能够从生物体组织中采取的上皮组织、结合组织、筋组织、神经组织等，具体地说，列举出皮肤（表皮、真皮）、软骨、角膜、网膜、骨膜、骨、神经、肌肉、粘膜、牙周组织、血管、脂肪，或者心脏、肝脏、胰脏、肾脏或膀胱等组织或脏器的一部分。而且，培养细胞得到的细胞片或细胞块（球形体）或者在支架（Scaffold）中播种了细胞的培养组织等单种或者多种的细胞构成的细胞集团也能够用作本发明的组织片。

而且，作为处理液，除了用于输送组织片的输送液、用于对组织片进行消毒的消毒液、用于对组织片进行清洗的清洗液、用于从组织片中分离出细胞的酶溶液之外，列举出培养基等。作为输送液，列举出磷酸缓冲液（PBS）、林格氏液、培养基等。作为清洗液，列举出磷酸缓冲液（PBS）、林格氏液、生理食盐液等。作为消毒液，列举出酒精、聚乙烯吡咯酮碘溶液等。作为酶溶液，列举出结晶胰蛋白酶或分散酶、胶原酶、白明胶酶等各种蛋白酶、各种肽酶、各种糖分解酶等。作为培养基，列举出DMEM（含各种氨基酸和葡萄糖的培养基）、α－MEM、无血清培养基等各种液体培养基，也可以添加有FBS（胎牛血清）等血清、青霉素或链霉素等抗生剂、成長因子、抗坏血酸等各种添加物质。