[发明专利]基于pI的蛋白质分级

权利要求书

1.一种在一个维度中从样品中分离一种或多种目标蛋白质的方法，所述方法包括，

向腔室中加入样品，所述样品含有包含一种或多种目标蛋白质的蛋白质混合物，其特征在于，所述腔室包含第一和第二电极和位于所述腔室壁上所述电极之间并通过双极膜与所述腔室中的所述样品分离的至少一个质子注射器或氢氧根注射器；

跨越所述电极施加电压，从而使蛋白质基于所述蛋白质的电泳迁移率沿着所述腔室的一个维度定位；

使用所述质子注射器或氢氧根注射器产生pH梯度，从而使蛋白质基于所述蛋白质的等电点(pI)沿着所述腔室的同一个维度定位；并且

使一种或多种蛋白质从腔室移动入与通道流体连通的端口，所述移动通过物理泵或电渗泵实现。

2.如权利要求1所述方法，其特征在于，所述腔室包括聚丙烯酰胺凝胶。

3.如权利要求2所述方法，其特征在于，所述方法还包括从所述聚丙烯酰胺凝胶中收集所述一种或多种蛋白质。

4.一种在一个维度中从样品中分离一种或多种目标蛋白质的方法，所述方法包括，

向腔室中加入样品，所述样品含有包含一种或多种目标蛋白质的蛋白质混合物，其特征在于，所述腔室连有通过双极膜与所述腔室分隔的质子和/或氢氧根注射器，用于通过注射离子流在所述腔室内沿一条轴线建立pH梯度，能够在pH梯度中形成一级或多级pH；

沿所述腔室的所述轴线对所述腔室内的蛋白质进行电泳；以及

随后使用质子和/或氢氧根注射器在所述腔室内产生pH梯度，从而使蛋白质基于所述蛋白质的等电点(pI)和电泳迁移率沿着所述腔室的轴线定位。

5.如权利要求4所述方法，其特征在于，在所述pH梯度建立期间继续进行所述电泳。

6.如权利要求4所述方法，其特征在于，所述方法还包括收集所述一种或多种目标蛋白质。

7.一种在一个维度中同时根据等电点和电泳迁移率分离多种分子分析物的装置，所述装置包括，

用于沿一条轴线盛放含多种分子分析物的溶液的腔室；

用于在所述腔室内沿所述轴线施加电场的电源；

通过注射离子流在所述腔室内沿所述轴线建立pH梯度，能够在pH梯度中形成一级或多级pH的一个或多个质子/氢氧根源；和

操纵所述一个或多个质子/氢氧根源以调节所述pH梯度来引起所述分子分析物沿所述轴线分别迁移并捕获的控制器，

其中所述腔室包含适用于电泳的筛分介质。

8.如权利要求7所述装置，其特征在于，所述腔室包含与所述腔室流体连通的一个或多个端口，并且所述端口能够移动地定位于所述腔室中以根据分析物的位置捕获所需的分析物。

9.一种在一个维度中从样品中纯化目标蛋白质的方法，所述方法包括，

向腔室中加入样品，所述样品含有包含所述目标蛋白质的蛋白质混合物；

跨越电极施加电压，从而使蛋白质基于所述蛋白质的电泳迁移率沿着所述腔室的一个维度定位；

使用质子和/或氢氧根注射器在所述腔室中产生pH梯度，从而使蛋白质基于所述蛋白质的等电点(pI)沿着所述腔室的同一个维度定位；

使所述目标蛋白质从腔室移动入与通道流体连通的一个或多个端口，其中所述移动通过物理泵或电渗泵实现，从而从所述混合物的其他组分中纯化所述目标蛋白质；以及

捕获后对所述蛋白质进行结晶。

10.如权利要求9所述方法，其特征在于，通过与所述通道流体连通的多个端口收集多种目标蛋白质。