[发明专利]检测沙门氏菌属微生物的方法

说明书

相关申请的交叉引用

本专利申请要求提交于2011年12月28日的美国临时专利申请No.61/580,849的权益，该专利申请以引用的方式全文并入本文。

背景技术

肠杆菌科(Enterobacteriaceae)包括能够将糖类(例如，葡萄糖)发酵为乳酸和/或其他酸性终产物的很多种代谢上不同的、兼性厌氧的细菌。该科包括多种熟知的人类致病菌，诸如大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门氏菌属的若干亚种、鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)的若干菌种和志贺氏菌属(Shigella)的若干菌种。

沙门氏菌属包括两个物种，肠道沙门氏菌(S.enterica)和邦戈尔沙门氏菌(S.bongori)，其包括能够导致人类疾病的亚种。一些病原性沙门氏菌能够通过受污染的食物或饮料的摄取而传染至人类。由于样品中相对低数量的沙门氏菌属微生物的存在、样品中相对高数量的近缘的非沙门氏菌属肠道微生物的存在和/或样品中能够干扰沙门氏菌属微生物的生长或检测的非微生物的物质(例如，食物颗粒或可溶性化学物质)的存在，食品样品中沙门氏菌属微生物的检测能够是困难的。

已开发了多种选择性的和/或区别性的微生物培养基，以检测样品中的沙门氏菌属微生物并且将它们与一种或多种非沙门氏菌属微生物加以区分。通常，这些培养基包含抑制非肠道微生物的生长的选择剂。此外，许多这些培养基依靠一种或多种区别性指示剂系统来区分沙门氏菌属和非沙门氏菌属的微生物。

尽管有多种用于检测样品中沙门氏菌属微生物的微生物培养基，仍然存在对检测样品中沙门氏菌属微生物的改进的方法的需求。

发明内容

一般来讲，本公开涉及用于检测沙门氏菌属微生物在试验样品中的存在或不存在的组合物和方法。具体地，所述组合物有利于沙门氏菌属微生物的生长并且包含至少一种抑制革兰氏阳性微生物的生长的选择剂。此外，所述组合物包括至少两种区别性指示剂系统。区别性指示剂系统中的至少一种阳性地区分沙门氏菌属微生物与非沙门氏菌属微生物，并且区别性指示剂系统中的至少一种阴性地区分沙门氏菌属微生物与非沙门氏菌属微生物。

在一个方面，本公开提供了组合物。所述组合物能够包含半固体培养基，所述半固体培养基包含胶凝剂、抑制革兰氏阳性微生物的生长的至少一种第一选择剂、包含至少一种第一区别性指示剂化合物的第一区别性指示剂系统和包含被脲酶活性转化为第二可检测产物的第二区别性指示剂化合物的第二区别性指示剂系统。第一区别性指示剂化合物能够被沙门氏菌属的多个成员转化为第一可检测产物。第一区别性指示剂化合物不能够被在所述培养基之内和/或之上形成可检测的菌落的非沙门氏菌属的、革兰氏阴性的肠道微生物的多个属转化为第一可检测产物。

在所述组合物的任何实施例中，第一区别性指示剂化合物能够包含选自蜜二糖、2-脱氧-D-核糖、甘露糖醇、L-阿拉伯糖、半乳糖醇、麦芽糖、L-鼠李糖、海藻糖、D-木糖、山梨糖醇以及上述化合物中的任何两种或更多种的组合的化合物。在任何上述实施例中，所述组合物还能够包含缓冲剂。所述缓冲剂能够选自MOPS、磷酸盐、TES、HEPES以及它们的组合。

在任何上述实施例中，所述组合物还能够包括第三区别性指示剂系统，所述第三区别性指示剂系统包含被β-半乳糖苷酶活性转化为第三可检测产物的第三区别性指示剂化合物。在任何实施例中，第三区别性指示剂化合物能够包含显色酶底物。在任何实施例中，第三区别性指示剂化合物能够选自5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷、5-溴-6-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷、邻-硝基苯基-β-D-半乳糖苷、对-硝基苯基-β-D-半乳糖苷、3,4-环己酮七叶苷-β-D-半乳糖苷和6-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷。

在任何上述实施例中，所述至少一种第一选择剂能够选自胆汁盐、胆酸、脱氧胆酸、结晶紫或上述化合物中任何两种或更多种的组合。在任何上述实施例中，所述pH指示剂能够选自酚红、氯酚红、中性红、溴百里酚蓝和溴百里酚紫。