[发明专利]抗α-共核蛋白抗体诊断脑中的α-共核蛋白的升高水平的用途

说明书

电子递交的序列表的引用

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背景

公开领域

本公开涉及抗α-共核蛋白(synuclein)抗体诊断脑中的α-共核蛋白的升高水平的用途。确切来说，本公开涉及在向测试受试者施用抗α-共核蛋白抗体或其抗原结合片段之后评价血浆或脑脊髓液(CSF)中的α-共核蛋白的水平的方法，所述抗α-共核蛋白抗体或其抗原结合片段可以结合具有足够活性的α-共核蛋白以改变从脑至血液或脑至CSF的α-共核蛋白的净流出。

公开背景

哺乳动物脑通过定位于脑毛细管和软蛛网膜下的膜的血脑屏障(BBB)和定位于绒毛膜丛的血液-脑脊髓液(CSF)屏障而与血液分开。α-共核蛋白在非病理条件下在脑中相对丰富。它是主要存在于胞质溶胶中的天然未折叠蛋白。它通过增加从突触前末梢释放的递质而在突触传递和突触可塑性中起重要作用。(Liu等,EMBO J23:4506–4516(2004))。α-共核蛋白的突变与早期发作的帕金森氏病的罕见家族情况相关，并且α-共核蛋白从它的可溶形式转变成聚集的不可溶形式是神经变性病症(如帕金森氏病、路易体痴呆(DLB)以及若干其它神经变性疾患)发病的重要事件之一。(Dawson等,Science302:819–822(2003)；Bennett等,Pharmacol Ther.105:311–331(2005)；George,JM.,Genome Biol.3(1):reviews3002.1–reviews3002.6(2002))。另外，已经在帕金森氏病患者的脑脊髓液(CSF)和血清中发现单体α-共核蛋白和低聚体α-共核蛋白，因为很明显α-共核蛋白和甚至它的聚集的种类可以穿过血脑屏障。(El-Agnaf等,FASEB J.20:419–425(2006)；Tokuda等,Biochem Biophys Res Commun.349:162–166(2006)；Lee等,J Neural Transm.113:1435–1439(2006)；Mollenhauer等,Exp Neurol.213:315–325(2008)；El-Agnaf等,FASEB J.17:1945–1947(2003)；Li等,Exp Neurol204:583–588(2007)。

对帕金森氏病的小鼠模型的免疫研究示出抵抗α-共核蛋白的小鼠单克隆抗体可以减少细胞内α-共核蛋白聚集体的积聚(Masliah等,Neuron,46:857–868(2005)；Masliah等,PLoS One,6(4):e19338(2011)支持了中和神经毒性聚集体而不会干扰单体α-共核蛋白的有益功能的抗体可以是有用的治疗剂的想法。然而，鉴于它们的非人来源，基于鼠的抗体在人中的治疗用途和诊断用途会通过人抗小鼠抗体(HAMA)反应受阻。

因此，存在对开发一种用于评价患者脑中的α-共核蛋白的升高水平的方法的需要。

简述

一个实施方案涉及一种诊断测试受试者的脑中的α-共核蛋白的升高水平的方法，所述方法包括：(a)在向测试受试者外周施用抗α-共核蛋白抗体或其抗原结合片段之后，在指定时间间隔下测定从测试受试者获得的血浆样品中的α-共核蛋白的水平，其中抗体或其片段可以结合具有足够亲和性的α-共核蛋白以改变从脑至血液的α-共核蛋白的净流出；(b)将测试受试者中的α-共核蛋白的测定的水平与参比标准比较；其中血浆样品与参比标准中的α-共核蛋白的水平之间的差异或相似性与测试受试者的脑中的α-共核蛋白的水平相关。

还公开了一种诊断测试受试者的脑中的α-共核蛋白的升高水平的方法，所述方法包括：(a)提供抗α-共核蛋白抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其片段可以结合具有足够亲和性的α-共核蛋白以改变从脑至血液的α-共核蛋白的净流出；(b)指导医疗服务提供者向测试受试者外周施用抗体并且在施用之后在指定的时间间隔下从受试者获得血浆样品；(c)测定血浆样品中的α-共核蛋白的水平；(d)将测试受试者中的α-共核蛋白的测定的水平与参比标准比较；其中血浆样品与参比标准中的α-共核蛋白的水平之间的差异或相似性与测试受试者的脑中的α-共核蛋白的水平相关。