[发明专利]具有蛋白酶活性的多肽有效
| 申请号: | 201280064408.4 | 申请日: | 2012-12-20 | 
| 公开(公告)号: | CN104024408B | 公开(公告)日: | 2019-04-19 | 
| 发明(设计)人: | T·霍夫;C·舍霍尔姆;P·R·厄斯特高;K·蓬托皮丹 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司 | 
| 主分类号: | C12N9/54 | 分类号: | C12N9/54;A23K20/189;C11D3/386 | 
| 代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人: | 顾小曼 | 
| 地址: | 丹麦,*** | 国省代码: | 丹麦;DK | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 具有 蛋白酶 活性 多肽 | ||
1.一种具有蛋白酶活性的分离的多肽,该分离的多肽选自由以下各项组成的组:
(a)由SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5加N端His标记、SEQ ID NO:5加N端HQ标记、SEQ ID NO:2加N端His标记、或SEQ ID NO:2加N端HQ标记构成的多肽;
(b)由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:1加编码N端His标记的多核苷酸、或SEQ ID NO:1加编码N端HQ标记的多核苷酸所编码的多肽。
2.权利要求1所述的多肽,其中所述具有蛋白酶活性的多肽获得自或能够获得自芽孢杆菌属。
3.权利要求1所述的多肽,根据Suc-AAPF-pNA分析,在37℃和pH4-5时,所述多肽比10R蛋白酶具有更高的相对蛋白酶活性。
4.权利要求1或2所述的多肽,根据Protazyme AK测定法,在15℃-60℃温度下,所述多肽在pH4时比10R蛋白酶在pH6.5时具有更高的相对活性。
5.权利要求1-3任一项所述的多肽,在pH3-5和40℃时,所述多肽对大豆-玉米粉比10R蛋白酶具有提高的蛋白酶活性。
6.权利要求1-3任一项所述的多肽,当与不存在蛋白酶的空白样品相比时所述多肽具有改善的肉仔鸡消化物的蛋白降解活性,该活性表现为在40℃下1小时之后砂囊中游离α-氨基基团的水平。
7.权利要求1-3任一项的多肽,根据OPA测定法,当用肉仔鸡砂囊消化物孵育时,与10R蛋白酶相比,所述多肽释放更多的伯胺。
8.一种组合物,该组合物包含权利要求1-7中任一项所述的多肽。
9.一种分离的多核苷酸,该多核苷酸编码如权利要求1-7中任一项所述的多肽。
10.一种核酸构建体或表达载体,该核酸构建体或表达载体包含如权利要求9所述的多核苷酸,该多核苷酸可操作地连接至在表达宿主细胞内指导该多肽产生的一个或多个控制序列上。
11.一种重组表达宿主细胞,该重组表达宿主细胞包含如权利要求10所述的核酸构建体或表达载体。
12.一种产生如权利要求1-7中任一项所述的多肽的方法,该方法包含:
(a)培养一种细胞,在有益于产生该多肽的条件下,处于野生型形式的该细胞产生该多肽;并且
(b)回收该多肽。
13.一种产生如权利要求1-7中任一项所述的多肽的方法,该方法包含:
(a)在有益于产生该多肽的条件下培养如权利要求11所述的重组表达宿主细胞;并且
(b)回收该多肽。
14.一种产生如权利要求1-7中任一项所述的多肽的方法,该方法包含:
(a)在有益于产生该多肽的条件下培养一种转基因植物或植物细胞,所述转基因植物或植物细胞用编码权利要求1-7中任一项所述的多肽的多核苷酸转化;并且
(b)回收该多肽。
15.至少一种如权利要求1-7中任一项所述的多肽在以下各项中的用途:
(i)在动物饲料中;
(ii)在动物饲料添加剂中;
(iii)在用于动物饲料的组合物的制备中;
(iv)用于提高动物饲料的营养价值;
(v)用于增加动物饲料中的可消化和/或可溶性蛋白;
(vi)用于增加动物饮食中的蛋白的水解度;和/或
(vii)用于处理蛋白。
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