[发明专利]用于产生发酵产物的方法

权利要求书

1.一种用于由含淀粉材料产生发酵产物的方法，包括以下步骤：

i)使用

-细菌α-淀粉酶，所述细菌α-淀粉酶得自嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)菌株且是SEQ ID NO:1具有以下突变的变体：I181*+G182*+N193F，并截短至491个氨基酸，其中使用SEQ ID NO:1或WO 99/019467中SEQ ID NO:3进行编号；并且进一步具有以下一个或者一个以上的突变：V59A/E/I/Q,Q89R,G112D,E129V,K177L,R179E,H208Y,K220P,N224L,S242Q,Q254S,D269E,I270L,H274K,Y276F,D281N,M284T/V,N376*,I377*,G416V以及L427M

-具有SEQ ID NO:14且具有G128D+D143N或者G128D+D143N+K192R突变的真菌生淀粉水解α-淀粉酶，所述生淀粉水解α-淀粉酶得自微小根毛霉(Rhizomucor pusillus)并具有黑曲霉(Aspergillus niger)葡糖淀粉酶接头与SBD，；

-具有K79V取代的SEQ ID NO:9且在70℃、pH 5.3具有至少70％热稳定性的真菌葡糖淀粉酶，所述葡糖淀粉酶得自草酸青霉(Penicillium oxalicum)菌株，

在60～80℃的温度下使含淀粉材料液化；

ii)使用糖源生成酶进行糖化；

iii)使用发酵生物体进行发酵。

2.根据权利要求1的方法，在液化步骤i)之前还包括以下步骤：

a)降低含淀粉材料的粒度；

b)形成包含含淀粉材料和水的浆料。

3.根据权利要求2的方法，其中通过干磨降低含淀粉材料的粒度。

4.根据权利要求1～3中任一项的方法，其中至少50％的含淀粉材料可通过具有#6筛网的筛。

5.根据权利要求4的方法，其中至少70％的含淀粉材料可通过具有#6筛网的筛。

6.根据权利要求4的方法，其中至少80％的含淀粉材料可通过具有#6筛网的筛。

7.根据权利要求4的方法，其中至少90％的含淀粉材料可通过具有#6筛网的筛。

8.根据权利要求1～3中任一项的方法，其中液化步骤i)过程中的pH为4～6。

9.根据权利要求8的方法，其中液化步骤i)过程中的pH为4.5～5.0。

10.根据权利要求8的方法，其中液化步骤i)过程中的pH为4.5～4.8。

11.根据权利要求8的方法，其中液化步骤i)过程中的pH为5.0～6.0。

12.根据权利要求1～3中任一项的方法，其中液化过程中的温度为70～80℃。

13.根据权利要求12的方法，其中液化过程中的温度为75～80℃。

14.根据权利要求12的方法，其中液化过程中的温度为75℃。

15.根据权利要求1～3中任一项的方法，其中液化进行0.1～10小时。

16.根据权利要求15的方法，其中液化进行1～3小时。

17.根据权利要求15的方法，其中液化进行1.5小时。

18.根据权利要求15的方法，其中喷煮步骤在步骤i)的液化之后进行。