[发明专利]用于治疗多发性硬化的APC介导的耐受诱导

说明书

背景技术

人们对于多发性硬化(MS或播散性脑脊髓炎)的原因尚不清楚并且对于导致疾病产生的致病过程也不完全了解。当前知识支持靶向髓磷脂组分或髓磷脂产生细胞的T细胞介导的自身免疫致病机理。MS和其动物模型实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)的特征在于中枢神经系统(CNS)内的抗原呈递细胞(APC)和自身反应性淋巴细胞的活化和积聚。已知被自身反应性T细胞识别的一些髓磷脂蛋白质包括髓磷脂碱性蛋白质(MBP)、蛋白脂质蛋白质(PLP)和髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白(MOG)。

髓磷脂碱性蛋白质(MBP)是少突胶质细胞和施旺(Schwann)细胞的髓鞘的主要组分。其人类直系同源物(orthologue)的遗传数据于美国国家生物技术信息中心(US National Centre for Biotechnology Information)(NCBI)以基因ID4155公开；人类MBP蛋白质数据可于UniProt以P02686获取。

蛋白脂质蛋白质(PLP；亲脂素)是来自中枢神经系统的主要髓磷脂蛋白质。其在髓磷脂多层结构的形成或维持中起着重要作用。其人类直系同源物的遗传数据以NCBI基因ID5354公开；人类MBP蛋白质数据可于UniProt以P60201获取。

髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白(MOG)是相信在提供髓鞘的结构完整性中起作用的糖蛋白。其人类直系同源物的遗传数据以NCBI基因ID4340公开；人类MBP蛋白质数据可于UniProt以Q16653获取。

对于多发性硬化的病原学尚未完全了解，并且目前没有可用的治愈性治疗。已显示去除T细胞的自体骨髓移植在有关多发性硬化患者的临床试验中有效并且有益。然而，因自身反应性T细胞重新出现所导致的疾病复发表明具体治疗应考虑永久免疫耐受的诱导。然而已经在若干研究中证明的抗髓磷脂T-细胞反应性模式(抗原扩散)的动态变化，以及通过改变基于肽配体的治疗安全地诱导耐受的困难，已经提出了关于当前策略用于多发性硬化的抗原特异性免疫疗法的有用性的问题。

自身免疫疾病的标准治疗依赖于全身性免疫抑制。然而，即使有上述困难，重要的仍然是设计保持免疫系统对抗病原和癌症的能力的新颖抗原特异性治疗形式。例如，先前研究已经显示，利用表达MOG或PLP的标准γ反转录病毒载体转导的骨髓源HSC可保护小鼠免于EAE。这些研究者使用了可在不同造血细胞中介导MOG表达的组成型启动子，这可引起不良副作用。为了克服这种局限性，Ko等在标准γ反转录病毒载体的背景下使用了cd11c启动子来引导树突细胞(DC)表达MOG。尽管这种策略延缓了疾病发作，但它并不会阻止EAE产生(Ko等，2010,Eur.J.Immunol.40,3499-3509)。

Dresch等(J.Immunology2008,181；4495-4506)证明，利用从DC-特异性DC-STAMP启动子表达EGFP或卵白蛋白(OVA)的自失活(SIN)慢病毒载体转导造血干细胞(HSC)导致转基因表达对DC的转录靶向和免疫耐受的抗原特异性诱导。

本发明的目标是提供允许诱导对MS中自身抗原反应性免疫过程的耐受的手段和方法，由此逆转多发性硬化的已建立的自身免疫过程、缓解其症状并终止其进展。

发明内容

根据本发明的第一方面，提供核酸序列。此核酸序列包含受表达序列，所述受表达序列编码包含含于选自以下的组的人类蛋白质中的至少9个氨基酸的连续序列(contiguous sequence)的多肽：髓磷脂碱性蛋白质、蛋白脂质蛋白质和髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白。所述受表达序列是在DC-STAMP启动子序列的转录控制之下。

根据本发明的第二方面，提供慢病毒，所述慢病毒包含核酸序列，所述核酸序列包含受表达序列，其在DC-STAMP启动子序列的转录控制之下、编码包含含于选自以下的组的人类蛋白质中的至少9个氨基酸的连续序列的多肽：髓磷脂碱性蛋白质、蛋白脂质蛋白质和髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白。

根据本发明的第三方面，提供分离的树突细胞，所述分离的树突细胞包含受表达核酸序列，其在DC-STAMP启动子序列的转录控制之下、编码包含含于选自以下的组的人类蛋白质中的至少9个氨基酸的连续序列的多肽：髓磷脂碱性蛋白质、蛋白脂质蛋白质和髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白。