[发明专利]对除草剂具有增加的耐受性的植物

权利要求书

1.用于控制植物栽培位点处不合需要的植被的方法，所述方法包括以下步骤：

a)在所述位点处提供包含至少一种核酸的植物，所述核酸包含：

(i)编码对香豆酮衍生物除草剂具有抗性或耐受性的野生型羟苯基丙酮酸双加氧酶或突变的羟苯基丙酮酸双加氧酶(mut-HPPD)的核苷酸序列和/或

(ii)编码对香豆酮衍生物除草剂具有抗性或耐受性的野生型尿黑酸茄尼基转移酶或突变的尿黑酸茄尼基转移酶(mut-HST)的核苷酸序列

b)向所述位点施用有效量的所述除草剂。

2.根据权利要求1的方法，其中(i)的核苷酸序列包含SEQ ID NO：1、51、3、4、6、7、9、10、12、13、15、16、18、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、52的序列、或其变体或衍生物。

3.根据权利要求1的方法，其中(ii)的核苷酸序列包含SEQ ID NO：47或49的序列、或其变体或衍生物。

4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中所述植物包含至少一种额外的异源核酸，所述异源核酸包含(iii)编码除草剂耐受性酶的核苷酸序列。

5.根据权利要求1至4中任一项的方法，其中香豆酮衍生物除草剂连同一种或多种其他HPPD-和/或HST靶向除草剂一起施用。

6.用于鉴别香豆酮衍生物除草剂的方法，所述方法通过使用由包含SEQ ID NO：1、51、3、4、6、7、9、10、12、13、15、16、18、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、52的核苷酸序列、或其变体或衍生物的核酸编码的mut-HPPD，和/或通过使用由包含SEQ ID NO：47或49的核苷酸序列、或其变体或衍生物的核酸编码的mut-HST来进行鉴别。

7.根据权利要求6的方法，包括以下步骤：

a)生成包含编码mut-HPPD的核酸的转基因细胞或植物，其中表达mut-HPPD；

b)向a)的转基因细胞或植物及向相同品种的对照细胞或植物施用香豆酮衍生物；

c)在施用所述测试化合物之后，测定转基因细胞或植物

及对照细胞或植物的生长或生存力，及

d)较之转基因细胞或植物的生长，选择赋予对照细胞或植物降低的生长的测试化合物。

8.鉴别编码对香豆酮衍生物除草剂具有抗性或耐受性的mut-HPPD的核苷酸序列的方法，所述方法包括：

a)生成mut-HPPD编码核酸的文库，

b)通过在细胞或植物中表达每种所述核酸并用香豆酮衍生物处理所述细胞或植物，来筛选所得mut-HPPD编码核酸的群体，

c)比较由所述mut-HPPD编码核酸群体提供的“香豆酮衍生物”耐受性水平与由对照HPPD编码核酸提供的“香豆酮衍生物”耐受性水平，

d)较之由对照HPPD编码核酸提供的对“香豆酮衍生物”的耐受性水平，选择提供对“香豆酮衍生物”的耐受性水平显著增加的至少一种mut-HPPD编码核酸。

9.根据权利要求8的方法，其中较之由对照HPPD编码核酸所提供的对香豆酮衍生物除草剂的耐受性，在步骤d)中选择的mut-HPPD编码核酸提供至少2倍的对香豆酮衍生物除草剂的耐受性。

10.根据权利要求8或9的方法，其中通过生成包含步骤a)的文库的核酸序列的转基因植物并比较所述转基因植物与对照植物来测定抗性或耐受性。

11.经分离的编码mut-HPPD的核酸，所述mut-HPPD包含SEQ ID NO：2、5、8、11、14、17、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、53、或其变体或衍生物的序列。

12.根据权利要求11的经分离的核酸，其中所述核酸能够通过如权利要求8至10中任一项所定义的方法鉴别。