[发明专利]人体内氧自由基检测方法有效
| 申请号: | 201280053851.1 | 申请日: | 2012-09-05 |
| 公开(公告)号: | CN104024852A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
| 发明(设计)人: | 尹重根;朴龙爱;金泰完;姜相训 | 申请(专利权)人: | DFI株式会社 |
| 主分类号: | G01N33/52 | 分类号: | G01N33/52;G01N21/78 |
| 代理公司: | 北京金信立方知识产权代理有限公司 11225 | 代理人: | 朱梅;张皓 |
| 地址: | 韩国庆*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 人体内 自由基 检测 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种作为人体内有害要素的氧自由基的检测方法,更具体地说,本发明涉及一种将检测试纸浸到尿液中定量检测出残留体内的氧自由基的量从而得以更简便快速地检测人体内氧自由基的量的方法。
背景技术
为了生存及活动人类依靠碳水化合物与脂肪代谢供应足够的能量(ATP),如果不能为细胞内部供氧人类就无法生存,为了产生该能量,在人体内进行的氧代谢过程中会以副产物的方式产生有害氧或称为活性氧的自由基(Free radical)。该氧自由基对人体造成各种不良影响,例如,其在人体组织内部产生脂质过氧化物。脂质过氧化是在细胞膜里持续发生的生理作用,其导致不饱和脂质的氧化损伤。
即,作为活性氧的自由基等物质使含有大量不饱和脂肪酸的细胞膜的磷脂质氧化而在细胞膜生成脂质过氧化物。也即是说,氧自由基增加时脂质的过氧化物生成也会增加,过度的脂质过氧化物会导致由脑血管梗塞所引起的脑中风、心肌哽塞、酒精性肝炎等肝脏疾病以及各种人体疾病。
因此,作为健康预防指标而定量检测氧自由基的量是具有非常重要意义的举措,血液里存在的有害氧自由基由于其反应性非常重要而很难直接测量。因此利用间接方式检测出由氧自由基导致的脂质过氧化物的量之后将其作为氧自由基的指标而得到广泛应用。一般来说,丙二醛(Malondialdehyde(MDA))是一种能够确定脂质过氧化程度的测量方法之一,也是可以在血液组织中容易检测并评估健康影响程度的指标,测量丙二醛(Malondialdehyde(MDA)能够得知脂质的过氧化程度,由于能够在血液、尿液中检测出而受到青睐,其方法主要使用HLPC法与TBARS法(thiobarbituric acid reactant substrate)。两种方法虽然都可以定量,但是与需要使用高价设备的HLPC法相比,TBARS法应用更广泛。但,该方法也需要煮样本并且需要经过利用有机溶剂提取的复杂过程,因此不仅其操作需要花费较多时间,而且只能由具备专业知识的特殊人员实行,因此无法使其获得广泛的应用。而且,该方法还可以与丙二醛(MDA)以外的其它物质进行反应而减弱了特异性。
解决的技术课题
为了解决现有技术存在的上述根本问题,本发明的目的是提供一种人体内氧自由基的检测方法,该方法简单地将试纸浸到尿液中并通过颜色指示剂的颜色变化就能够进行丙二醛(MDA)的定量检测,因此不需要额外的设备和专业人员。
本发明的目的不限于上述目的,前文没有提到的本发明的其它目的可以从后述说明中得到明确阐释。
发明内容
为了达到上述目的,本发明提供一种人体内氧自由基检测方法,其特征在于,把涂有与丙二醛反应后引起颜色变化的颜色指示剂的试纸粘附在支撑对象上,把被粘附在支撑物的试纸浸到尿液中并通过颜色变化而检测氧自由基的量。
而且优选地,上述试纸以下述方式形成,将试片浸入到使用1,3-二乙基-2-硫代巴比妥酸(1,3-Diethyl-2-Thiobarbituric Acid(TBA))作为颜色指示剂并且将由10-30%的枸橼酸(CitricAcid)、20-30%的枸橼酸三钠(Trisodium Citrate)与蒸馏水混合制成的第一溶液中,然后在大约50到60℃干燥该试片20到30分钟,再将该试片浸入第二溶液中,该第二溶液是以乙醇(Ethyl Alcohol)用作溶剂混合作为2-3%的颜色指示剂TBA和2-5%的聚合物聚乙烯吡咯烷酮(PVP,Polyvinylpyrrolidone)而制成的,然后干燥形成所述试纸。
进一步地,上述试纸可以以下述方式形成,使用盐基品红(Basic fuchsine)作为颜色指示剂并且将由20-30%的焦亚硫酸钠(Na-Metabisulfite)及20-30%的NDS酸与蒸馏水混合制成的第一溶液,及由乙醇作为溶剂混合10-30%的颜色指示剂盐基品红(Basic Fuchsine)制成的第二溶液,分别将试片浸入到上述两种溶液后并予以干燥后形成试纸,或者使用盐酸副玫瑰苯胺(Pararosaniline Hydrochlpride)作为颜色指示剂并且将包含20-40%的磺基水杨酸(Sulfosalicylic acid)、20-40%的NDS酸及5-15%Urea的蒸馏水制成的第一溶液及以蒸馏水作为溶剂混合5-15%的盐酸副玫瑰苯胺(Pararosaniline Hydrochloride)、20-40%的磺基水杨酸(Sulfosalicylic acid)及20-40%的NDS酸之后制成的第二溶液,然后分别将试片浸入所述两种溶液中形成试纸。
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