[发明专利]对除草剂具有增强的耐受性的植物

权利要求书

1.控制植物栽培场所不需要的植被的方法，所述方法包括以下步骤：

a)在该场所提供包含至少一个核酸的植物，其中所述核酸包含：

(i)编码对香豆酮衍生物除草剂具有抗性或耐受性的野生型羟苯基丙酮酸双加氧酶或突变的羟苯基丙酮酸双加氧酶(mut-HPPD)的核苷酸序列，和/或

(ii)编码对香豆酮衍生物除草剂具有抗性或耐受性的野生型尿黑酸茄尼基转移酶或突变的尿黑酸茄尼基转移酶(mut-HST)的核苷酸序列，

b)向该场所施用有效量的所述除草剂，

其中所述香豆酮衍生物除草剂包含具有选自表2式1、2、3和4的通式的化合物。

2.根据权利要求1的方法，其中(i)的核苷酸序列包含SEQ ID NO:1,51,3,4,6,7,9,10,12,13,15,16,18,19,21,23,25,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,52,54,56的序列、或其变体或衍生物。

3.根据权利要求1的方法，其中(ii)的核苷酸序列包含SEQ ID NO:47或49的序列、或其变体或衍生物。

4.根据权利要求1至3之任一的方法，其中植物包含至少一个另外的异源核酸，所述核酸包含(iii)编码除草剂耐受酶的核苷酸序列。

5.根据权利要求1至4之任一的方法，其中香豆酮衍生物除草剂组合一种或多种其它HPPD和/或HST靶向除草剂一起施用。

6.鉴定香豆酮衍生物除草剂的方法，所述方法通过使用由包含核苷酸序列SEQ ID NO:1,51,3,4,6,7,9,10,12,13,15,16,18,19,21,23,25,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,52,54,56或其变体或衍生物的核酸编码的mut-HPPD、和/或使用由包含核苷酸序列SEQ ID NO:47或49或其变体或衍生物的核酸编码的mut-HST来进行，其中所述香豆酮衍生物除草剂包含具有选自表2式1、2、3和4的通式的化合物。

7.根据权利要求6的方法，其包含以下步骤：

a)生成包含编码mut-HPPD的核酸的转基因细胞或植物，其中表达mut-HPPD；

b)对a)的转基因细胞或植物和对相同品种的对照细胞或植物施用香豆酮衍生物；

c)测定施用所述测试化合物之后转基因细胞或植物及该对照细胞或植物的生长或生存力，及

d)选择使对照细胞或植物的生长较之转基因细胞或植物的生长降低的测试化合物。

8.鉴定编码对香豆酮衍生物除草剂具有抗性或耐受性的mut-HPPD的核苷酸序列的方法，该方法包括：

a)生成mut-HPPD编码核酸的文库，

b)通过在细胞或植物中表达每种所述核酸且用香豆酮衍生物处理所述细胞或植物，筛选所得mut-HPPD编码核酸的群体，

c)比较由所述mut-HPPD编码核酸群体提供的“香豆酮衍生物”耐受性水平与由对照HPPD编码核酸提供的“香豆酮衍生物”耐受性水平，

d)选择至少一种mut-HPPD编码核酸，较之对照HPPD编码核酸，其提供对“香豆酮衍生物”的显著增加的耐受性水平，

其中所述香豆酮衍生物除草剂包含具有选自表2式1、2、3和4的通式的化合物。

9.根据权利要求8的方法，其中较之由对照HPPD编码核酸提供的对香豆酮衍生物除草剂的耐受性，步骤d)中选出的mut-HPPD编码核酸提供至少2倍的香豆酮衍生物除草剂耐受性。

10.根据权利要求8或9的方法，其中抗性或耐受性通过生成包含步骤a)的文库的核酸序列的转基因植物和比较所述转基因植物与对照植物而测定。

11.编码mut-HPPD的分离的核酸，所述核酸包含SEQ ID NO:2,5,8,11,14,17,20,22,24,26,28,30,32,34,36,38,40,42,44,46,53,55,57,58,59,60,61,62,63,64,65,66,48,50、或其变体或衍生物。

12.权利要求11的分离的核酸，其中核酸可以通过权利要求8至10之任一中定义的方法鉴定。